AAT Bioquest 16350  Cell Meter™ 荧光细胞内一氧化氮 （NO） 活性检测试剂盒

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AAT Bioquest 荧光一氧化氮活性检测试剂盒-常备现货

美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助 quan 世 jie 的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

AAT Bioquest 16350 Cell Meter™ 荧光细胞内一氧化氮 （NO） 活性检测试剂盒 *针对酶标仪优化的橙色荧光*  200 Tests，产品简介：

产品品牌：AAT Bioquest

产品货号：16350

产品名称：Cell Meter™ 荧光细胞内一氧化氮 （NO） 活性检测试剂盒

产品规格：200 Tests

AAT Bioquest 荧光一氧化氮活性检测试剂盒-常备现货 

AAT Bioquest 16350 Cell Meter™ 荧光细胞内一氧化氮 （NO） 活性检测试剂盒 *针对酶标仪优化的橙色荧光*  200 Tests，产品说明：

一氧化氮（NO）是一种重要的生物调节因子，参与许多生理和病理过程。NO生成改变与各种免疫，心血管，神经退行性和炎症性疾病有关。作为一种自由基，NO被迅速氧化，体内存在的NO浓度相对较低。检测和理解NO在生物系统中的作用一直具有挑战性。细胞计™荧光法细胞内一氧化 dab 检测试剂盒提供了一种灵敏的工具，用于监测活细胞中的细胞内NO水平。我们的试剂盒中开发并使用了硝酸™探针，作为DAF-2的  jue jia 替代品，用于检测和成像细胞中的游离NO。与常用的DAF-2探针相比，硝酸™探针具有更好的光稳定性和增强的细胞通透性。该特定试剂盒使用硝 suan ™橙，可以与NO反应产生明亮的橙色荧光产物，其光谱特性类似于Cy3®和TRITC。亚硝 suan ™橙可以很容易地加载到活细胞中，并且可以使用Cy3®或TRITC的滤光片组方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。

平台

荧光酶标仪

Excitation：540 纳米

Emission：590 纳米

近路：570 纳米

推荐板：黑色墙壁/透明底部

仪器规格：底部读取模式

组件

组分A：500X亚硝酸™橙 1 瓶 （50 μL）

组分B：检测缓冲液I 1 瓶 （20 mL）

组分C：检测缓冲液II     1 瓶 （20 mL）

1. 在生长培养基中制备细胞

2. 用测试化合物和硝酸™橙工作溶液在37孵育细胞oC 表示所需时间段

3. 添加检测缓冲液II

4. 在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）或使用TRITC滤光片监测荧光显微镜下监测荧光强度（底部读取模式）

重要说明：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒成分。

工作溶液的制备

将 20 μL 500X 亚硝酸橙储备溶液（组分 A）加入 10 mL 检测缓冲液 I（组分 B）中，充分混合制成硝酸™™橙工作溶液。这种硝酸™橙工作溶液在室温下至少可稳定保存 2 小时。避光。注意：20 μL 500X 亚硝™酸橙储备溶液足以用于一个板。

实验方案样本

1. 为了刺激内源性NO，在细胞培养基或所需的缓冲液（如PBS或HHBS）中用10 μL 10X测试化合物（96孔板）或5 μL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的培养基或复合缓冲液。注意：在添加化合物之前不需要清洗细胞。但是，如果测试化合物对血清敏感，则可以在添加化合物之前吸走生长培养基和血清因子。抽吸后加入 90 μL/孔（96 孔板）和 20 μL/孔（384 孔板）的 1X Hank 盐溶液和 20 mM Hepes 缓冲液 （HHBS） 或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

2. 在细胞板中加入 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的亚硝酸™橙工作溶液。将细胞与测试化合物和硝酸™橙工作溶液在 37°C 下共孵育所需的时间，避光。注意：请勿去除测试化合物。对于NONOate阳性对照处理：将细胞与硝酸™橙工作溶液在37°C下孵育30分钟。除去工作溶液，并将细胞进一步与1mM DEA / NONOate在37°C下孵育30分钟以产生一氧化氮。注意：我们使用 Raw 264.7 细胞在 0°C 的细胞培养基中与 5.20X 硝酸™橙、1 μg/mL 脂多糖 （LPS） 和 37 mM L-精an酸 （L-Arg） 一起孵育 16 小时。有关详细信息，请参见图 1。

3. 去除每个孔中的溶液。

4. 对于100孔板，添加96μL/孔的测定缓冲液II（组分C）或对于25孔板的384μL/孔。注意：添加检测缓冲液II前不要洗涤细胞。

5. 使用酶标仪在Ex / Em = 540 / 590nm（截止= 570nm）下以底部读取模式监测荧光增加，或使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜拍摄图像。

产品订购信息：

16350 Cell Meter™ 荧光细胞内一氧化氮 （NO） 活性检测试剂盒 *针对酶标仪优化的橙色荧光*  200 Tests