AAT Bioquest  13812  Amplite® Fluorimetric L-Lactate Dehydrogenase (LDH) Assay Kit 200Tests 

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美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助quan世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

 AAT Bioquest荧光L-乳酸脱氢酶LDH试剂盒

AAT Bioquest13812 Amplite® Fluorimetric L-Lactate Dehydrogenase (LDH) Assay Kit 200Tests，产品简介：

产品品牌：AAT Bioquest

产品货号：13812

产品名称：Amplite®荧光L-乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒

英文名称：Amplite® Fluorimetric L-Lactate Dehydrogenase (LDH) Assay Kit

产品规格：200 Tests

产品说明：

乳酸脱氢酶（LDH）是一种氧化还原酶，可催化**酸和乳酸的相互转化。LDH存在于多种生物体的细胞质中，包括动物和植物。细胞在组织损伤或红细胞溶血后将LDH释放到血液中。由于LDH是一种相当稳定的酶，因此已被广泛用于评估组织和细胞的损伤和*性的存在。LDH的定量具有广泛的应用。在某些病理条件下，如癌症，LDH也会升高。该 Amplite® 乳酸脱氢酶检测试剂盒提供了一种基于荧光的方法，用于检测血清、血浆、尿液等生物样品以及细胞培养样品中的 L-乳酸脱氢酶 （L-LDH）。在酶偶联测定中，LDH与由荧光NADH传感器专门监测的NADH浓度成比例相关。该测定对L-LDH具有特异性。荧光信号可由荧光酶标仪读取。使用该荧光 Amplite® L-乳酸脱氢酶检测试剂盒，我们能够在 1 μL 反应体积中检测到低至 100 mU/mL 的 L-乳酸脱氢酶。

平台

吸光度酶标仪

吸光度 575/605 纳米

推荐板 纯白色

荧光酶标仪

Excitation 540 纳米

Emission 590 纳米

Cutoff     570 纳米

推荐板 纯黑色

组件

组分A：酶探针 1瓶（冻干粉）

组分B：检测缓冲液 1 瓶 （10 mL）

组件 C：NAD 1瓶

组分 D：L-LDH 10 U/瓶

示例协议

一目了然

协议摘要

1. 制备L-乳酸脱氢酶工作溶液（50μL）

2. 加入L-乳酸脱氢酶标准品或测试样品（50μL）

3. 在室温下孵育30分钟-2小时

4. 在Ex/Em = 540/590 nm处监测荧光增加

重要注意事项

在开始实验之前，在室温下解冻每种试剂盒组分之一。

储备液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

1. NAD 储备液 （100X）：

加入 100 μL H₂O放入NAD（组分C）的小瓶中，制成100X NAD储备溶液。

2. L-LDH标准溶液（100 U/mL）：

加入100 μL H₂O或1X PBS缓冲液放入L-LDH标准品（组分D）的小瓶中，制成100 U / mL L-LDH标准溶液。

标准溶液的制备

L-乳酸脱氢酶标准

将 10 μL L-LDH 标准溶液加入 990 μL 1X PBS 缓冲液中，生成 1000 mU/mL L-LDH 标准溶液。取1000 mU/mL L-LDH标准溶液进行1：3连续稀释，得到L-LDH标准品（L-LDH1 - L-LDH7）的连续稀释液。注意：稀释的L-LDH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

工作溶液的制备

1. 将 10 mL 检测缓冲液（组分 B）加入酶探针（组分 A）瓶中，以获得酶探针混合物。注意：这种酶探针混合物足以用于两个 96 孔板。

2. 将 50 μL NAD 储备溶液 （100X） 加入 5 mL 酶探针混合物中，并充分混合。注意：这种L-LDH工作溶液不稳定，应及时使用。

实验方案样本

表 1.L-LDH标准品和测试样品在纯黑色96孔微孔板中的布局。L-LDH = L-LDH 标准品 （L-LDH1 - L-LDH7， 0.3 至 300 mU/mL）;BL = 空白控件;TS = 测试样品。

提单 提单 TS TS

L-乳酸丁酸甘油酯1 L-乳酸丁酸甘油酯1 ... ...

L-乳酸丁酸甘油酯2 L-乳酸丁酸甘油酯2 ... ...

L-乳酸丁酸甘油酯3 L-乳酸丁酸甘油酯3    

L-乳酸丁酸甘油酯4 L-乳酸丁酸甘油酯4    

L-乳酸丁酸甘油酯5 L-乳酸丁酸甘油酯5    

L-乳酸丁酸甘油酯6 L-乳酸丁酸甘油酯6    

L-乳酸丁酸甘油酯7 L-乳酸丁酸甘油酯7    

表 2.每个孔的试剂组成。

井 卷 试剂

L-乳酸丁酸1 - L-

乳酸丁酸7 50 微升 连续稀释（0.3 至 300 mU/mL）

提单 50 微升 稀释缓冲液

TS 50 微升 测试样品

1. 根据表1和表2中提供的布局制备L-LDH标准品（L-LDH），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂而不是 50 μL。

2. 向L-LDH标准品、空白对照和测试样品的每个孔中加入50 μL L-LDH工作溶液，使总测定体积为100 μL/孔。对于 384 孔板，向每个孔中加入 25 μL 工作溶液，总体积为 50 μL/孔。

3. 将反应物在室温下孵育30分钟至2小时，避光。

4. 使用荧光板读数器在激发= 530 - 570 nm，发射= 590 - 600 nm（最佳Ex / Em = 540 / 590 nm，在570 nm处截止）监测荧光增加。注意：板的内容物也可以转移到白色/透明底板上，并通过吸光度酶标仪以A的比例读取575纳米/一个605纳米.然而，与荧光读数相比，吸收检测的灵敏度较低。

  AAT Bioquest荧光L-乳酸脱氢酶LDH试剂盒

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