Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物_蛋白酶抑制剂-赛默飞世尔科技（中国）有限公司手机版

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Thermo Scientific Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，仅用一种溶液即可方便地完成对样品的保护。这种广谱的抑制剂混合物已经经过专门的优化，在抽提和纯化的过程中能够防止蛋白降解。该混合物含有针对主要蛋白酶和磷酸酶家族(详情见下表)的抑制剂，主要抑制氨基肽酶、半和蛋白酶、/和磷酸酶。如需抑制金属蛋白酶，还有单独提供0.5M的EDTA。

产品特点：

方便的一管装抑制剂混合物，既含有蛋白酶抑制剂也含有磷酸酶抑制剂。
四种方便的包装：即用独立包装、1ml、5 x 1ml及10ml。
快速抑制-不需要解冻、不需要等待片剂溶解，开管即用。
与Thermo Scientific Pierce细胞裂解缓冲液兼容。
与质谱(MS)兼容。

该混合物是同类产品中的组成形式。产品为溶液形式，使用DMSO作为溶剂，仅需低温储存而无需冷冻。在处理不足10ml的样品时仅需吸取合适的量加入即可，但使用片剂时往往需用保险刀片将其切割成合适的大小并即时进行溶解（单一片剂的最小样本量一般为10ml)。更加重要的是，与片剂产品相比，该产品能够在裂解过程中有效地抑制蛋白酶的同时，保持了细胞收集过程中蛋白的磷酸化状态。由于该产品不含有能够造成峰漂移的AEBSF组分，所以该产品能够与MS兼容。

蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物中包含的抑制剂及其针对的酶的类别

抑制剂	目标酶的类别
氟化钠	/和酸性磷酸酶
原钒酸钠（Sodium Orthovanadate）	和碱性磷酸酶
β-甘油磷酸酯	/磷酸酶
焦磷酸钠（Sodium Pyrophosphate）	/磷酸酶
（Aprotinin）	蛋白酶
抑氨肽酶（Bestatin）	氨基肽酶
E64	半蛋白酶
亮抑蛋白酶肽（Leupeptin）	/半蛋白酶
EDTA(可选)	金属蛋白酶

在HeLa细胞裂解液中，Thermo Scientific Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物比片剂型的磷酸酶抑制剂混合物更有效地保持磷酸化的PTEN和CDC2的磷酸化状态。去除血清后培养HeLa细胞24小时。然后加入含血清培养基并培养15分钟，利用含有或者不含1X抑制剂混合物的Thermo Scientific M-PER*哺乳动物细胞总蛋白抽提试剂（产品货号 78501）裂解细胞。片剂型抑制剂用1ml缓冲液溶解，然后按照1:100的比例加入到裂解试剂中。将Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物直接加入到裂解试剂中。利用的抗体通过蛋白质免疫印迹分析蛋白磷酸化状态的保持情况。图A. 磷酸化的PTEN,图B.磷酸化的CDC2。使用的抗体能够分别地识别和上的磷酸化。

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