在细胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞分裂和细胞凋亡等许多重要的生物学通路的调控开关。Thermo Scientific Halt磷酸酶抑制剂混合物( 产品货号78420)能够保持细胞和组织中蛋白的磷酸化状态。该混合物中含有四种广谱的磷酸酶抑制剂的混合物,这四种抑制剂包括氟化钠, 原钒酸钠, 焦磷酸钠和β-甘油磷酸酯。其他商购的磷酸酶抑制剂混合物仅可抑制/磷酸酶或者蛋白磷酸酶中的一种,Halt磷酸酶抑制剂混合物与之不同,该混合物对这两个家族的磷酸酶都能有效抑制。该混合物以100X浓缩液的形式提供并具有多种包装,该混合物可保存在4°C,并且与Thermo ScientificBCA蛋白定量分析试剂盒(产品货号23225)、Thermo Scientific增强型考马斯蛋白定量分析试剂盒(产品货号23236)等常规蛋白定量分析方法兼容。
产品特点:
- 一种溶液 – 既可抑制/磷酸酶也可抑制蛋白磷酸酶。
- 相容性强 – 与包括BCA蛋白定量分析试剂盒、增强型考马斯蛋白定量分析试剂盒在内的常规蛋白定量分析方法兼容。
- 储存方便 – 仅需2-8°C保存即可,节省冷冻室空间。
- 浓缩 – 1ml混合物可保护100ml样品不被降解。
在HeLa细胞裂解液中,Thermo Scientific Halt磷酸酶抑制剂混合物能够保持MEK, MAP激酶42/44和STAT3的磷酸化状态。去除血清后培养HeLa细胞24小时。然后加入含血清培养基并培养15分钟,分别在含有(+)或者不含(-)1X浓度的Halt磷酸酶抑制剂混合物的情况下裂解HeLa细胞。通过蛋白质免疫印迹分析总蛋白和磷酸化蛋白。图A.MEK和磷酸化的MEK (PMEK),图B.MAP激酶和PMAP激酶,图C.STAT3和PSTAT3。这些蛋白的磷酸化分别发生在、/和上。
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