目前所使用的酵母中DNA抽提和纯化的方法耗时耗力。,由于酵母细胞具有复杂蛋白质细胞壁,导致其非常难以裂解。而在Thermo Scientific Y-PER酵母DNA抽提试剂盒中,利用Thermo Scientific Y-PER酵母细胞抽提试剂可以快捷便利的裂解酵母细胞。 这种基于试剂的方法优于常规的酵母DNA分离方法。整个过程仅需一小时并且不需要酶处理或者玻璃珠裂解,同时几乎没有RNA污染。
在研究啤酒酵母时, 使用该酵母DNA抽提试剂盒可以稳定的获得大量的基因组和质粒DNA。纯化的DNA适用于聚合酶链式反应(PCR)§扩增(详情见图)、细菌转化(化学法和电穿孔法制备的感受态细胞均可)、限制性内切酶消化以及杂交等实验。
产品特点:
- 不需要玻璃珠裂解或者剧烈的酶处理。
- 制备的DNA可用于聚合酶链式反应(PCR)。
- 可以快速地从啤酒酵母中分离质粒DNA,分离的DNA可用于大肠杆菌的转化。
- 放大性好 – 从单克隆到500ml培养物均可处理。
抽提酵母基因组DNA并且进行下游的PCR扩增。从转化了含有绿色荧光蛋白(GFP)基因质粒的啤酒酵母DY150株中提取DNA,并以纯化的DNA为模板扩增染色体基因ACT1和UME6以及质粒上携带的GFP基因。
泳道1. 用Hind III降解Lambda DNA;
泳道2. 啤酒酵母基因组DNA (分子量较小的条带为大约5 kb,对应于酵母杀伤病毒的dsRNA);
泳道3. PCR扩增质粒中的GFP;
泳道4. PCR扩增基因组基因ACT1;
泳道5. PCR扩增基因组基因UME6。
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