Thermo Scientific细胞表面蛋白分离试剂盒是能够方便地进行化并分离细胞表面蛋白的试剂盒,该试剂盒特异性地针对细胞表面蛋白,能有效地排除胞内蛋白的干扰。该试剂盒能够高效地标记一些具有赖氨酸并且充分暴露在胞外的蛋白。在该分离方法中使用了一种不可透过细胞膜的,可切除的化试剂( Sulfo-NHS-SS-Biotin)来标记细胞表面蛋白暴露在外的伯胺。接下来收集并裂解细胞,使用Thermo Scientific中性亲和素琼脂糖树脂对标记的细胞表面蛋白进行亲和纯化。在这样分离的细胞表面蛋白的伯胺上仅残留有小的、无反应活性、非化的标签(仍然结合在树脂上)。
产品特点:
- 分离细胞表面蛋白 – 降低全细胞蛋白的复杂性。
- 高效回收标记的蛋白 – 使用可切除的可得到接近99%的细胞表面蛋白的回收率。
- 方便 – 试剂盒提供实验所需的所有试剂,还提供标记、细胞裂解和纯化细胞表面膜蛋白的完整说明。
- 可用于蛋白免疫印迹 – 利用SDS-PAGE缓冲液回收的蛋白可直接进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。
- 稳定可靠 – 实验方案适用于NIH 3T3、HeLa、C6及A431等多种细胞。
特异针对细胞表面蛋白的分离方法。图片所示是针对细胞表面蛋白(图A)和胞内蛋白(图B)分别进行蛋白质免疫印迹的结果,样品是利用细胞表面蛋白分离试剂盒处理HeLa细胞所得。加号(+)代表利用Sulfo-NHSSS-Biotin 试剂处理过的细胞的结果;减号(-)代表不用试剂处理但是其他步骤仍按试剂盒的方法进行的细胞的结果。泳道分别是无样品树脂对照(R),穿柱液(F)及洗脱组分(E)。目标细胞表面蛋白在加号E组分和负号F组分中出现表明使用该试剂盒成功地分离了目标蛋白。胞内蛋白在加号和减号的F组中均出现了表明标记和纯化都是专一的针对细胞表面蛋白的。
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