法匹拉韦中有关物质的HPLC法测定

ZORBAX 80Å StableBond
色谱柱性能指标
键合相孔径比表面积温度上限* pH 范围* 封端碳载量
性能指标只代表典型值

法匹拉韦 分析液相柱 880975-902

*StableBond 色谱柱是为在低pH 条件下优化使用而设计的。在pH 6-8，操作温度<40ºC，且使用浓度范围为0.01-0.02M 的低浓度缓冲液时，所有硅胶基色谱柱均可得到gao的柱稳
定性。对于中等pH 值范围，建议使用Eclipse XDB 和Bonus-RP。
• 低pH 范围（低到pH 1）分离时具有长的柱寿命和的重现性
• Zhuan利的稳定色谱柱固定相允许其在高温、低pH 条件下使用而不发生降解
• 六种不同的键合相提供了广泛的选择性——SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、
SB-C3 和SB-Aq
• 高纯度（B 型）硅胶保证了良好的峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色谱柱使用Zhuan利的、*的、单官能团硅烷，其具有较大的二异丁基(SB-C18) 或二异丙基（SB-C8、SB-C3、SB-Phenyl、SB-CN 和SB-Aq）侧链基团，空间位阻关键的硅氧烷键合到硅胶表面，以避免在低pH 条件下水解破坏。为了在酸性流动相条件下提供良好的稳定性并使寿命长，重现性*，StableBond 填料不封端。高纯度、低酸度的硅胶为酸性、碱性和中性化合物提供了出色的峰形，因此使得StableBond色谱柱成为低pH 方法开发的Shou选。ZORBAX StableBond 色谱柱可与所有常用流动相兼容，包括水含量很高的流动相。

摘要目的: 建立测定法匹拉韦有关物质的HPLC 法。

方法: 色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18( 250mm × 4.6mm，5.0um) ;
流动相为磷酸缓冲液( 取磷酸二氢钾1． 4 g，加水至1 000 ml，用磷酸调节pH 至4.0 ± 0.05) -乙腈( 90∶ 10) ; 检测波长为238 nm;
流速为1． 0 ml·min － 1 ; 柱温为30℃，进样量为20L。结果: 在选定的色谱条件下，各杂质峰与主峰分离度良好; 法匹拉韦、杂质1、杂质2、杂质3、杂质4 范围内与峰面积呈
良好的线性关系( r≥0． 999 6) ; 杂质1、杂质2、杂质3、杂质4 的平均回收率分别为98． 6%、97． 8%、99． 7%、100． 8%，ＲSD 分别
为1． 6%、2． 5%、1． 8%、2． 8%( n = 9) 。结论: 该方法灵敏度高、精密度好、专属性强，可用于法匹拉韦有关物质的检测。
关键词法匹拉韦; 有关物质; 高效液相色谱法。

法维拉韦(又称 “法匹拉韦”) ，是一种新型RNA依赖的RNA聚合酶抑制剂，属于广谱抗流感bingdu药物  ，用于治疗新型和复发型流感 。
法匹拉韦是一种新型广谱抗RNAbingdu药物，而新观病毒属于RNA单链病毒 。研究表明，除流感病毒外，该药还对多种RNA病毒展现出良好的抗病毒作用，如埃博拉病毒、沙粒病毒、布尼亚病毒、狂犬病毒等  。
法维拉韦的原研药物AVIGAN由富士胶片集团富山化学工业株式会社开发 ，2014年3月，法匹拉韦在日本批准上市 ，成为日本的国家战略储备药物  。2016年6月，海正药业与日本富山化学工业株式会社签订化合物专lidu家授权协议。海正药业负责在中国研发、制造、销售含法匹拉韦的抗流感病du药物。
据科技部2月15日公布的消息，法匹拉韦是治疗新观肺炎三个临床试验西药之一(另外两个是：磷酸氯喹和瑞德西韦)，对治疗新观肺炎初步显示了较明显的疗效和较低的不良反应。

Agilent ZORBAX StableBond 色谱柱
低pH 范围（低到pH 1）分离时具有长的柱寿命和醉好的重现性
砖利的稳定色谱柱固定相允许其在高温、低pH 条件下使用而不发生降解
六种不同的键合相提供了广泛的选择性——SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、SB-C3 和SB-Aq
StableBond 色谱柱是为在低pH 条件下优化使用而设计的。在pH 6-8，操作温度<40ºC，且使用浓度范围为0.01-0.02M 的低浓度缓冲液时，所有硅胶基色谱柱均可得到醉高的柱稳定性、高纯度（B 型）硅胶保证了良好的峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色谱柱使用砖利的、*的、单官能团硅烷，其具有较大的二异丁基(SB-C18) 或二异丙基 侧链基团，空间位阻关键的硅氧烷键合到硅胶表面，以避免在低pH 条件下水解破坏。为了在酸性流动相条件下提供良好的稳定性并使寿命长，重现性家，StableBond 填料不封端。高纯度、低酸度的硅胶为酸性、碱性和中性化合物提供了出色的峰形，因此使得StableBond色谱柱成为低pH 方法开发的手选。ZORBAX StableBond 色谱柱可与所有常用流动相兼容，包括水含量很高的流动相。

法匹拉韦 分析液相柱 880975-902

在使用流动相冲洗色谱柱后，测量甲苯的保留时间（其作为色谱柱损坏的指标）。在极低PH (0.8) 和高温(90°C) 条件下工作三个月后，只有StableBond SB-C18 未发生变化。ZORBAX Rx-C18 还可提供稳定的基质，并且可以用作StableBond SB-C18 的替代产品。
双封端、密集键合和耐用的Rx-Sil 填料（溶胶型）相结合，与此处所用的单封端凝胶硅胶柱相比，在pH 7 条件下的寿命更长。该分析所用的条件——高温(60°C) 和高盐浓度(250 mM)，加快了硅胶的溶解，造成溶胶-凝胶型硅胶色谱柱过早失效。
Eclipse XDB 色谱柱在较宽的pH 范围内有良好的稳定性。pH 较低时，封端的Eclipse 色谱柱特别稳定，pH 3 时与未封端的SB-C8 色谱柱的稳定性相当。这种色谱柱可在60ºC 用pH 3 的流动相冲洗。然后用强碱性化合物测定。以确定封端或键合固定相是否从硅胶表面水解。在12000 倍柱体积的测试之后耦米替零(amitriptyline) 的保留时间没有变化，说明Eclipse XDB 色谱柱非常稳定。在这些相同条件下，另一种封端的色谱柱显示出较差的稳定性。