PMSF的配置方法及注意事项

PMSF是丝氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶抑制剂。它抑制蛋白酶，如糜蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、巯基蛋白酶如凝血酶。PMSF抑制丝氨酸蛋白酶的磺化的丝氨酸残基的活性部位。

PMSF的配制方法：

溶解174mg的PMSF（苯钾基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml，分装成小份贮存于-20℃，使用时终浓度一般为1mmol/L。

使用介绍：

1）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）；

2）10mg/ml溶于异丙醇（或无水乙醇）中；

3）在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.；

4）工作浓度：17~174ug/ml（0.1~1mM），储存液浓度为100或200mM；

5）  在水液体溶液中不稳定，30分钟就会降解一半，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF，样品处理超过1h,补加一次。（见水分解，使用前加入）；

注意事项：

1.PMSF（苯钾基磺酰氟）溶解到异丙醇中，不能溶解到水中的。-20℃保存也会有结晶析出，这是正常的，等到温度稍高混匀就可以了。

2.PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一定要注意防护，手套和口罩。

3.一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

4.PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

5.PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。