NK细胞培养一直存在两种培养方式。
一种是滋养层细胞培养方式，首先获得具有不分裂不增殖但仍保持代谢活性的滋养层细胞。该细胞通过基因工程技术进行改造，再经过钴60辐照，细胞膜表面稳定表达多种细胞因子，在多种细胞因子协同作用下，外周血单个核细胞中的自然杀伤细胞得到定向激活和扩增，该种培养方式的价格相对便宜，仅有3000元左右。从培养结果来看，细胞收获量可达到20亿/L的水平，NK表型阳性率达到80%-90%左右。
另一种是NK细胞培养方式是纯因子细胞培养。顾名思义就是使用相应的细胞因子来刺激单个核细胞，向NK细胞方向诱导，并配合相应的细胞培养基，使NK细胞大量增殖。纯因子细胞培养技术以其安全性高而著称，其原因在于所使用的细胞因子，都是体内环境原本就存在的。培养过程相当于模拟体内环境，促进NK细胞的激活及大量增殖。日本在该项技术上走在前列。由于日本老龄化严重，因此抗衰老研究较多。NK细胞在抗衰老研究中的应用符合其严格的风险管理原则。因此国内使用的纯因子试剂盒多进口自日本。但由于技术壁垒，纯因子试剂盒的价格一直居高不下，多在6000元以上。
那为什么越来越多的人不愿再用滋养层细胞的形式培养NK细胞呢？
虽然滋养层细胞培养方式从培养结果来看，细胞收获量可达到20亿/L的水平，NK表型阳性率达到80%-90%左右，价格便宜、效果稳定，但用户对此种培养方式实际是心存排斥的，主要原因是在培养过程中选用的滋养层细胞为肿瘤细胞。尽管从理论上讲，经过相应处理的肿瘤细胞已经不再具备增殖的可能性。但其潜在风险难以证明可以*排除。另外，就是伦理方面的问题，将正常细胞与肿瘤细胞共培养，然后将培养后的NK细胞回输体内，确实存在难以克服的伦理障碍。正如上述原因，确实制约了滋养层培养技术的推广。
