免疫实验的可靠性分析

一　实验的稳定性

基本概念　

　　实验的稳定性主要是是对实验的重复性的优劣进行考察，通常采用变异系数进行定量分析。

测定方法

　　对一份标本进行多次检测，求出均值（X）和标准差(S)，进而将两者相比求出变异系数(CV)。

注意事项

1.某一方法的CV值与测定次数有很大关系，一般n>20后CV值趋于恒定，才宜做为恒量方法的可靠性的指标。

2.如果某项实验，实验组与对照组标本同时检测则采用批内CV值评价可靠性即可。即在同一时间测定一份标本20次。如果实验需在一段时间完成，即不能一次实验完成则应采用批间CV值评价可靠性即隔一段时间反复测定一份标本。如果实验需在不同实验室完成，则应采取室间CV值，即将一份标本分发到不同实验室进行反复测定。

3.免疫学实验很多是靠目测判定结果（如凝集效价等）。有较强的主观干扰和个人判定差异，故在评价实验可靠性时必须考虑实验者的差异。即同一份标本宜由不同操作者判定，统计CV值。

4.免疫学实验CV值宜控制在10%以内，>10%不宜采取计量分析。>20%则应将计量资料转变成为计数资料，一般而论免疫学实验稳定性不很理想，做为折中方法免疫学实验多采用不连续等级资料进行定量（如效价等），做这类资料CV值>10%时也应转变成为阴性或阳的计数资料，这样做虽然会损失一部分信息，但实验的可靠性则提高了，因为同时也很大程度去除了错误的信息。CV>50%时计数分析也不宜采用，即该项实验无使用价值。

5.做平行样可以提高实验的稳定性,但要注意的是：做双平行样时两个数据相差＞20%时应将这个标本删除，而不宜简单地取均值。做三平行样时宜采用中位数为观察值，如果中位数与相邻数差仍>30%也应将该标本数据删除。经验表明做平行样虽然可以大幅度提高实验的稳定性，降低标准差，减小CV值，但效率也随之降低。实际效果并不一定优于计数资料，但该方法对于标本来源困难的实验还是有意义的，必要时可以采取5平行对照，以减少样本损失。

二　实验的特异性

基本概念　

　　考虑标本中的某些物质可能会对某项实验结果造成干扰，故宜对实验的特异性做出判断，即实验的抗干扰性能。此为考察实验可靠性的重要的指标。

测定方法

　　以可能造成干扰的物质进行分组，如欲判定溶血对实验的影响，可采取溶血标本组和正常组进行分析；欲分析类风湿因子对实验的影响，可采用RF阳性组和RF阴性组进行分析。用实验同时测定已选定的两组标本，分析检测结果，理论上两组结果应相等则可判定实验结果不受干扰物质的干扰，实际使用中，两者结果的值之差之小于30%，统计学检验应无显著差异即可认为实验有可以接受的特异性。

注意事项

1.       一般以血清为标本的实验应对溶血，乳糜血标本对实验的影响作出判定，酶联免疫反应类的实验应对标本中RF对实验的影响做出判定。

2.　实验标本每组应不少于20例，否则无意义。

参考文献

1.　冯仁丰　刘永良　1990.　临床实验室建设与管理　上海：上海科学技术出版社　195－202

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（刘辉　刘启贵）

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