上海嵘崴达实业有限公司
2011/5/30 15:39:18单克隆抗体制备流程
1、动物的选择与免疫www.runwelltac.com
多采用6-12周龄SPF级雌性Balb/c小鼠。
免疫方法取决于所用抗原的性质。
免疫流程同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。
2、细胞融合
· 细胞融合关键：
· 细胞比例为1:10-1:5
· 融合过程操作要轻柔
· PEG厂家、批次、作用时间、温度控制
· 缓慢终止细胞融合
· 培养用胎牛血清
融合后细胞培养：注意细胞培养无污染
3、阳性克隆筛选
筛选方法以灵敏度高、特异性好、简便快捷为标准选择，还要考虑到抗原的具体性质。
4、杂交瘤的克隆化
5、杂交瘤细胞的冻存和复苏
6、单克隆抗体的大量生产
· 体外培养法收获细胞上清
· 小鼠体内接种杂交瘤细胞收获腹水
