高压蒸汽灭菌虽然具有灭菌速度快、效果可靠、温度高、穿透力强等优点,但如果使用不当,亦可导致灭菌的失败。
高压灭菌器灭菌时间控制：
高压灭菌器总时间包括：热力穿透时间，即从消毒柜内达到灭菌温度至消毒物品中心部位亦达到灭菌温度所需时间。时间的长短取决于消毒物品的性质、包装的大小,放置位置和高压锅内空气排空程度和灭菌器的种类。消毒维持时间，即杀灭微生物所需的时间，一般用杀灭脂肪嗜热杆菌芽胞所需时间来表示。在115℃时需30分钟，121℃时需12分钟，132℃时需2分钟。安全时间，一般为维持时间的一半，其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。
灭菌后消毒物品干燥,指示剂达到灭菌要求时即可出锅
取无菌物品时,要严格无菌操作,开盖物品先将盖盖好,贮槽关闭好通气孔。物品应贮放在离地面食，离顶不少于食,离墙反‘处,以减少来自地面、屋顶与墙壁的污染。同时应分类放置、顺序发放取用。超过有效期炎热潮湿季节一般不超过七天、寒冷干燥季节可延长至天的物品应停止发放。
一般而言，灭菌温度越低，高压灭菌器需要的灭菌时间越长；灭菌温度越高，高压灭菌器需要的灭菌时间越短。但是压力蒸汽灭菌的时间，要从高压灭菌器柜室内达到灭菌要求温度时算起，直至灭菌完成为止。
