细胞计数板是我们在细胞实验中常规使用的一种计量方法,那么,如何正确使用细胞计数板呢?
首先,在使用细胞计数板前,我们先了解下细胞计数板的构造。
然后,我们来说一下细胞计数板的使用步骤:清洁计数板和盖玻片→盖上盖玻片→加样→镜检→清洗.
这里和大家强调几点:
1.为什么说盖玻片很重要,因为计数区是控制深度的,0.100mm的这个深度对于计量准确性影响很大,而这个深度取决于盖玻片和计数板的贴合程度.
2.如果不做清洁或者清洁不*,加样过程中很容易出现空腔,如果出现空腔,就会影响到结果的准确性,需要重新清洁板子,重新加样.
3.加样一定是盖好盖玻片以后再进行加样.
4.上样量为10微升,需要定量.
5.加样后需要静置,等细胞沉降后进行镜检.
6.紧接着,就是最重要的环节—镜检。显微镜的操作使用就不一一赘述了,低倍镜找区域,高倍镜调焦,直到看清楚计数板的刻度线为止。计数的区域大家会有很多理解,其中有两种理解:第一种是,计数区域是“L”区,第二种是,计数区域是最中心区域的四角和中间。通常情况下,我们使用的计数方法,因为通量更高,也更容易观察。