单细胞铺板是将一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底。
单细胞铺板的好坏决定了后续实验的成败，这个实验看似简单，其实也不是那么好做，其中关键是要铺得均匀铺得平整，其中的操作蕴含着丰富技巧。
要铺出一个好的板子，必须要做到一下几点：
1、单细胞重悬
贴壁细胞培养完成后需要将细胞消化收集，并获得单细胞悬液，但这时候即便消化下来也会连在一起了。这时我们需要注意：消化细胞需要选择适用的消化液、适当的消化温度和时间；消化后需要轻轻拍打细胞贴壁面，震落细胞；少量培养基重悬，并用移液器反复吹散细胞。做到这几点后获得细胞悬液基本是单细胞悬液。
2、一步完成
获得细胞悬液后要先根据选择的培养板的种类，以及要种的细胞密度调整细胞悬液的浓度，可在离心管中调整后反复颠倒摇匀，种板需要一步完成，切不可先加细胞后补液或先加液再补细胞。
3、十字摇匀
细胞种板后将悬液铺满整个底面，为防止来回走动导致细胞局部不均匀，放置细胞培养箱内做十字摇匀，摇匀后就不能再移动，直到细胞贴壁方可。
单细胞铺板需要做到细胞均匀分布，密度适中。正确的铺板需要获得单细胞悬液，正确地调整密度，一步到位种植到培养板，通过十字摇法使细胞均匀分布。
