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制备液相色谱的实验步骤

Gilson中国-吉尔森实验仪器(上 >> 进入商铺

2023/10/25 14:35:19
  制备液相色谱是一种常用的分离和分析方法,适用于分离和纯化各种生物分子,如蛋白质、多肽、核酸等。与高效液相色谱相比,它主要用于大量样品的制备和工业生产,具有更高的分离度和更大的进样量。
 
  制备液相色谱的分离过程是在高压下进行的,通常采用固定相和流动相之间的相互作用来实现样品的分离。固定相通常是硅胶或聚合物颗粒,表面键合了不同的官能团,如氨基、羧基、疏水基等。流动相是水或有机溶剂,如甲醇、乙腈等。在分离过程中,样品溶液通过进样针注入色谱柱,色谱柱中的固定相与样品分子相互作用,使不同组分在色谱柱中得到分离。
 
  制备液相色谱的实验步骤包括以下步骤:
 
  样品准备:将需要分离的样品溶液进行过滤和浓缩,以便进行后续的色谱分离。
 
  仪器准备:将所需的仪器和配件准备齐全,如高压输液泵、色谱柱、检测器、进样针等。
 
  流动相配制:根据所需的分离效果,选择合适的流动相溶剂,并配制一定比例的流动相溶液。
 
  色谱柱活化:将色谱柱拆开,用少量流动相冲洗并活化固定相,以便样品分子可以更好地与固定相相互作用。
 
  进样:将样品溶液通过进样针注入色谱柱中,使样品分子与固定相相互作用。
 
  洗脱:通过泵入流动相,将样品分子从固定相中洗脱出来,并沿着色谱柱向前移动。
 
  收集:根据需要将各个组分收集起来,以备后续分析或制备使用。
 
  制备液相色谱在蛋白质组学、生物医药、环境科学等领域得到了广泛应用。通过分离和分析,可以获得各种生物分子在不同条件下的性质和结构信息,为科学研究提供重要的依据。此外,它还可以应用于工业生产中,如药物、食品、化妆品等领域的生产和质量控制中。

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