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Elabscience Annexin V-FITC / PI细胞凋亡检测试剂盒的操作方法有哪些?

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2024/1/2 9:48:51

Elabscience Annexin V-FITC / PI细胞凋亡检测试剂盒是用于检测悬浮细胞和贴壁细胞的凋亡试剂盒。那么你知道Annexin V-FITC / PI细胞凋亡检测试剂盒的操作方法有哪些吗?让我们一起来看看吧!

一步法

1.细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300 ×g 离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。

2.取 1~5 × 105 重悬的细胞,300 ×g 离心 5 min,弃上清。用 PBS 洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入500 μL稀释的1 × Annexin V Binding Buffer重悬细胞。

3.细胞悬液中加入5μL的Annexin V-FITC Reagent和5μL的 PI Reagent (50μg/mL)。

4.轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20 min。

5.立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

注:流式细胞仪检测时Annexin V-FITC可用FITC通道,PI 优先选择PerCP/Cy5.5 通道,其次是ECD通道。

两步法

1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300 ×g离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS 洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。

2. 取1~5 × 105重悬的细胞,300 ×g离心 5 min,弃上清。用 PBS 洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入100 μL 稀释的 1 × Annexin V Binding Buffer 重悬细胞。

3. 细胞悬液中加入 2.5 μL 的 Annexin V-FITC Reagent 和2.5 μL的PI Reagent (50μg/mL)。(由于两步法 分辨率更高,染色液用量减半依然可得到媲美一步法的效果;用户亦可根据自己的模型进行滴定后 加入适量的染色液,用更少的量获得高质量的结果。)

4. 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育 15~20 min。

5. 加入 400 μL 稀释的1 × Annexin V Binding Buffer,混匀样本。

6. 立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。 注:流式细胞仪检测时Annexin V-FITC 可用 FITC 通道,PI优先选择 PerCP/Cy5.5 通道,其次是 ECD 通道。

更多有关Elabscience Annexin V-FITC / PI细胞凋亡检测试剂盒的操作方法,请联系Elabscience试剂盒代理——北京百奥创新科技有限公司。


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