Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒的检测原理与注意事项

Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒采用分光光度法，可用于检测细胞、组织裂解液或其它样本的 caspase 2 活性。那么你知道Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒的检测原理与注意事项是什么吗？让我们一起来看看吧！

Caspase 2 也称 Ich-1 (ICE and CED-3 homolog 1)或 Nedd-2，在细胞凋亡的信号转导过程中可以被激活。Caspase 2 mRNA可以被剪切成两种不同长短的形式。Caspase 2 全长的 mRNA产物可以促进凋亡，而短的 mRNA 的蛋白产物则可以抑制细胞凋亡。在体外，Caspase 2 可以被 caspase 1、caspase 3 和granzyme B 激活。

一、检测原理

本caspase2活性检测试剂盒是基于caspase2可以催化底物Ac-VDQQD-pNA 产生黄色的 pNA(p-nitroaniline)，pNA在405nm附近有强吸收，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 2 的活性。

二、注意事项

1. 所有待检样本都需检测蛋白浓度，由于样本裂解液中含有还原剂，不适合使用 BCA 法进行蛋白浓度测定，推荐使用考马斯亮蓝法（Bradford 法）。

2. 建议在正式实验前，选择2~3个预期差异大的样本进行预实验，若样本吸光值超过标准曲线的测量范围，则需稀释样本或者调整上样量再进行测定。

3. 进行caspase 2活性测定的样本，其蛋白浓度应在1~4 mg/mL，否则会影响实验结果的准确性。

4. 一次实验的细胞数目建议不低于1×10⁶个，组织样本不低于50mg，以便达到1~4 mg/mL的蛋白浓度。否则会影响实验的精准度，导致蛋白浓度过低，反应体系内活性caspase 2过少而OD值偏低。

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