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D-荧光素钾盐应用全解析,生物活体成像实验更清晰!

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2024/2/19 10:49:27

D-Luciferin potassium salt中文名为D-萤光素钾盐,是受欢迎和通用的生物发光底物。萤光素酶/萤光素生物发光系统在萤火虫(Photinus pyralis)和其他几种甲虫中被发现。荧光素酶通过二氧酮中间体氧化ATP活化的荧光素。萤火虫荧光素酶通过ATP依赖的氧化荧光素产生光。该反应产生的 560nm 化学发光在几秒钟内达到峰值,当荧光素和ATP过量时,光输出与荧光素酶活性成正比。萤火虫荧光素酶长期以来一直被偶联到抗体和使用荧光素作为检测底物的免疫分析标签。与辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶相比,荧光素酶对化学修饰的耐受性较差。在科研领域,D-Luciferin广泛应用于基于萤火虫萤光素酶的报告基因检测和动物的活体成像实验。此外,荧光素酶的另一个重要用途是卫生监测领域。荧光素酶/荧光素系统可用于检测污染,因为所有生物体中都存在ATP来产生发光。这种类型的ATP生物发光的主要应用是通过测试食品加工厂的表面来确定设备或产品是否受到污染来保证质量。




体外实验方法
1.100×萤火虫荧光素酶底物收到后,若需要多次实验请分装,避光保存在-20℃,避免反复冻融;

2.准备过程:在预热过的培养基中制备0.5-1 mM的D-荧光素工作溶液;

3.细胞实验:正常培养的细胞弃去培养基,加入荧光素工作溶液,37°C下孵育细胞5-10分钟进行成像实验。


体内成像实验

1.在DPBS中制备15 mg/mL的荧光素原液,0.22 μm膜过滤保存,现配先用,若保存需避光保存在-20℃,避免反复冻融。

2.腹腔注射用量:根据动物体重参考用量为150 mg/kg(或10 μL/g上述制备的原液),参考时间为10-15 min后进行成像。实际操作建议应该对每个动物模型进行荧光素的动力学研究,以确定峰值信号时间。

逐典D-萤光素钾盐优势

1.高纯度(HPLC验证纯度≥99%)

2.优异的生物发光性能

3.高溶解度(>40mg/ml)

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