2024年上半年度，Ausbian®品牌系列血清，助力肿瘤相关研究，帮助多项科研成果成功并发表。本期内容，与缔一生物小助手一起，看看各位科学界的同仁都发表了哪些科技论文。
《Research Square》
Deciphering the effects of PYCR family on cell function, prognostic value, immune in ltration in ccRCC and pan-cancer
研究内容：
吡咯-5-羧酸还原酶(PYCR)是将吡咯-5-羧酸(P5C)转化为脯氨酸的关键，脯氨酸是脯氨酸合成的最后一步。PYCR1、PYCR2和PYCR3三种异构体存在，并在肿瘤的发生和发展中发挥着重要的调节作用。在这项研究中，科研人员先通过泛癌症分析评估PYCRs的分子和免疫特征，特别是关注它们与预后的相关性。然后，建立肾透明细胞癌(KIRC)特异性预后模型，结合病理特征来增强预测能力。通过体外实验研究PYCR1和PYCR2在肾癌细胞中的生物学功能和调控机制。PYCRs在多种肿瘤中的表达均升高，与不良临床结果相关。PYCRs在肿瘤信号通路中富集，与免疫细胞滤过、肿瘤突变负荷(TMB)和微卫星不稳定性(MSI)显著相关。在KIRC中，基于PYCR1和PYCR2的预后模型在统计学上得到了独立验证。利用h&e染色图像的特征，病理特征模型可靠地预测患者预后。体外实验表明，PYCR1和PYCR2通过激活mTOR通路，至少部分地增强了肾癌细胞的增殖和迁移。
其中，对人肾细胞癌细胞系，即Caki-1、786- 0和A498的体外培养，用到了Ausbian胎牛血清。
《PLOS ONE》
Functional analysis of ESM1 by shRNA-mediated knockdown of its expression in papillary thyroid cancer cells
研究内容：
内皮特异性分子-1 (ESM1)是多种人类癌症的致癌基因。然而，ESM1在乳头状甲状腺癌(PTC)中的功能尚不清楚。该研究旨在探讨ESM1对PTC生长、迁移和侵袭的影响，为PTC的治疗提供新的视角。采用免疫组化方法检测53例肿瘤组织样本和59例匹配的邻近正常组织样本PTC组织中ESM1的表达水平。通过在TPC-1和SW579细胞系中敲低ESM1的表达来研究其在PTC中的作用。此外，通过体外细胞增殖、凋亡、伤口愈合和transwell实验来评估细胞增殖、迁移和侵袭。结果显示，ESM1在PTC组织中的表达明显高于在副肿瘤组织中的表达(P<0.0001)。在体外实验中，敲低ESM1表达可抑制TPC-1和SW579细胞的增殖、迁移和侵袭。与对照组相比，PTC细胞中ESM1表达下调后，其mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.01)。此外，敲低esm1的细胞增殖能力降低，迁移和侵袭能力降低(P<0.01, P<0.01, P<0.001)。
得出结论ESM1是PTC发生发展的重要基因，可以促进PTC细胞的增殖、迁移和侵袭。它可能是一个很有前途的诊断和治疗靶基因。
其中，对人甲状腺癌细胞系：TPC-1、SW579和BCPAP的体外培养，用到了Ausbian胎牛血清。
《scientific reports》
Hesperetin promotes bladder cancer cells death via the PI3K/AKT pathway by network pharmacology and molecular docking
研究内容：
膀胱癌(BLCA)患者在手术和化疗后仍有高复发率。橙皮苷(Hesperetin, HE)作为一种天然化合物，因其毒性低、易于获取而备受关注。然而，HE对BLCA的抑制作用尚不清楚。利用网络药理学方法预测HE调控的中枢基因和富集途径在BLCA治疗中的作用。可视化了HE蛋白与枢纽蛋白的分子对接。用菌落和CCK8检测细胞增殖，用transwell和伤口愈合检测证实BLCA迁移。此外，通过Hoechst染色、透射电镜(TEM)和活性氧(ROS)测定证实了细胞凋亡和铁下垂的发生。Western Blotting验证中心蛋白、靶功能和通路。SRC, PIK3R1和MAPK1被确定为BLCA中HE的枢纽靶点，涉及PI3k/AKT通路。此外，HE抑制BLCA细胞的增殖和迁移。HE显著抑制MMP2/MMP9蛋白表达。Bax和cleaved caspase-3的表达增加表明HE可促进BLCA细胞凋亡。此外，Hoechst染色显示凋亡核的集中和照亮。ROS的激活和GPX4表达的下降提示HE可能通过抗blca过程诱导铁下垂。HE处理的BLCA细胞线粒体缩小，凋亡小体出现，线粒体嵴减少或缺失。科研人员提出HE可以抑制BLCA细胞的增殖和迁移，促进细胞凋亡和铁下垂。HE可能通过靶向SRC、PIK3R1和MAPK1等蛋白以及PI3K/AKT通路发挥作用。
其中，对人膀胱癌细胞T24(HTB-4)和5637(HTB-9)的体外培养，用到了Ausbian胎牛血清。
《cell death & disease》
Modification of BCLX pre-mRNA splicing has antitumor efficacy alone or in combination with radiotherapy in human glioblastoma cells
实验内容：
由异常剪接引起的抗凋亡和促凋亡蛋白异构体的失调是癌症的一个重要标志，并可能导致治疗耐药性。因此，靶向RNA剪接来重定向凋亡相关基因的异构体表达可能会导致有希望的抗癌表型。胶质母细胞瘤(GBM)是成人常见的恶性脑肿瘤。在该研究中，通过RT-PCR和Western Blot分析发现，BCLX pre-mRNA在GBM细胞中存在异常剪接，其中抗凋亡的Bcl-xL剪接更有利。使用剪接开关寡核苷酸(SSOs)调节BCLX pre-mRNA剪接可以有效地提高促凋亡异构体Bcl-xS，而降低抗凋亡的Bcl-xL。SSOs诱导Bcl-xS可激活GBM细胞凋亡和自噬。此外，科研人员发现电离辐射也可以调节BCLX的选择性剪接。与重(碳)离子辐照相比，低能x射线辐照诱导Bcl-xL/Bcl-xS的比值增加。通过剪接调控抑制Bcl-xL可显著增强二维和三维GBM细胞的辐射敏感性。这些结果表明，通过剪接开关寡核苷酸操纵BCLX前mrna选择性剪接是一种单独或联合放疗抑制胶质母细胞瘤肿瘤发生的新方法。
其中，对胶质母细胞瘤：A172, T98G, U251, U87, GSCs(人胶质瘤干细胞样细胞)，以及正常的人星形胶质细胞系HA1800的体外培养实验，均用到了Ausbian胎牛血清。
《APS》
O-GlcNAcylation mediates H2O2-induced apoptosis through
regulation of STAT3 and FOXO1
研究内容：O-linked-β- n -乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化(o - glcnac酰化)是一种关键的翻译后修饰，将外部刺激与细胞内信号转导网络偶联。然而，o - glcn酰化在氧化应激诱导的细胞凋亡中的关键蛋白靶点仍有待阐明。在这里，我们发现H2O2处理抑制o - glcn酰化，损害细胞活力，增加裂解caspase 3，加速神经母细胞瘤N2a细胞的凋亡。O-GlcNAc转移酶(OGT)抑制剂OSMI-1或O-GlcNAcase (OGA)抑制剂Thiamet-G分别增强或抑制h2o2诱导的细胞凋亡。OSMI-1抑制了总蛋白和磷酸化蛋白水平以及转录因子3 (STAT3)和叉头盒蛋白O1 (FOXO1)的启动子活性。相反，过表达OGT或用Thiamet-G处理会增加STAT3和fox01的总蛋白水平。STAT3或FOXO1过表达可消除osmi -1诱导的细胞凋亡。而在H2O2处理的细胞中，OGT和Thiamet-G的抗凋亡作用通过下调内源性STAT3或fox01的表达或活性而被消除。这些结果表明STAT3或fox01是参与H2O2诱导的N2a细胞凋亡的o - glcnac酰化的潜在靶点。
其中，对神经元-2a神经母细胞瘤细胞（N2a Cell）的体外培养，用到了Ausbian胎牛血清。
《Biology Direct》
RPL35A promotes the progression of cholangiocarcinoma by mediating HSPA8 ubiquitination
研究内容：
胆管癌(CCA)是一种胆道上皮恶性肿瘤，在世界范围内发病率不断上升。因此，需要进一步了解CCA进展的分子机制，以确定新的治疗靶点。免疫组化染色检测RPL35A在CCA和癌旁组织中的表达。IP-MS联合Co-IP鉴定了RPL35A调控的下游蛋白。采用Western blot和Co-IP对CHX或MG-132处理的CCA细胞进行检测，验证RPL35A对HSPA8蛋白的调控作用。通过细胞实验和裸鼠皮下肿瘤发生实验，在体内评价RPL35A和HSPA8对CCA细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移和肿瘤生长的影响。RPL35A在CCA组织和细胞中显著上调。RPL35A敲低抑制hcc -9810和HUCCT1细胞的增殖和迁移，诱导细胞凋亡，使细胞周期停留在G1期。HSPA8是RPL35A的下游蛋白，在CCA中过表达。RPL35A敲低会损害HSPA8蛋白的稳定性，增加HSPA8蛋白的泛素化水平。RPL35A过表达促进CCA细胞增殖和迁移。HSPA8敲低抑制CCA细胞增殖和迁移，逆转RPL35A的促进作用。此外，RPL35A在体内促进肿瘤生长。相反，HSPA8敲低抑制肿瘤生长，同时能够恢复RPL35A过表达的效果。RPL35A在CCA组织中表达上调，通过介导HSPA8泛素化促进CCA的进展。
其中，对4种胆管癌细胞系(hcc -9810、HUCCT1、QBC939、RBE细胞)和人肝内胆管上皮细胞(HIBEC细胞)的体外培养，均用到了Ausbian胎牛血清。
《PLOS PATHOGENS》
Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin
研究内容：
上皮细胞是抵御病原体入侵的主要防线。然而，细菌病原体具有破坏这一屏障并促进细菌迁移的能力。然而，结核分枝杆菌(M.tb)在这一过程中所采用的具体分子机制尚不清楚。科研人员通过评估Rv2569c切割e -钙粘蛋白的能力来研究Rv2569c在结核分枝杆菌易位中的作用，e -钙粘蛋白是细胞-细胞粘附连接的重要组成部分，在细菌入侵期间被破坏。利用在大肠杆菌中表达并通过亲和层析纯化的重组Rv2569c，科研人员证明了Rv2569c具有细胞壁相关丝氨酸蛋白酶活性。此外，Rv2569c能够降解一系列蛋白质底物，包括酪蛋白、纤维蛋白原、纤维连接蛋白和e -钙粘蛋白。科研人员还确定了Rv2569c蛋白酶活性的适宜条件是温度为37℃，pH为9.0,MgCl2存在。为了研究Rv2569c在结核分枝杆菌中的功能，科研人员制备了Rv2569c的缺失突变体及其补充菌株，并将其用于感染A549细胞和小鼠。A549细胞感染实验结果显示，Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力，促进M.tb通过极化的A549上皮细胞层迁移。此外，体内感染实验表明，Rv2569c可以破坏E-cadherin，增强M.tb的定植，并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理损伤。总之，这些结果强烈表明结核分枝杆菌利用丝氨酸蛋白酶Rv2569c破坏上皮防御，并通过跨越上皮屏障促进其全身传播。
其中，对肺腺癌细胞系A549的体外培养，用到了Ausbian胎牛血清。
