真菌毒素为真菌增殖时产生的次生有毒代谢产物。真菌的孢子能透过空气、风力、水流和动物等方式来传播。只要有少量蛋白质、淀粉、脂质及水分，真菌就能生长，因此谷物、果实类、玉米、花生、饲料及中药材等都可能检出真菌毒素。黄曲霉毒素具有潜在的肝毒害及致病性，其性质稳定，因此易出现在食物链中。
应用方案概述：
本篇以FaTEx-gen快速萃取净化柱进行前处理除杂，使用LC-MS/MS仪器分析谷类、花生、花生酱、豆类、饲料、中药材等基质中的11种真菌毒素，包含黄曲du素类、赭曲du素A及镰孢菌毒素类（伏马毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）、玉米赤霉毒素等），外标法定量分析。
样品制备流程如下：
秤样2g左右，加入一定体积的样品萃取溶液，高速震荡机震荡30分钟，于3500rpm离心5分钟，得到上清液。取一定体积的上清液加入FaTEx-gen 快速萃取净化柱，收集全部滤液混匀。取一定体积的滤液，氮吹回溶后上机到LC-MS/MS分析。
Agilent 6470液相层析串联式质谱仪搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，关于前处理详细步骤和仪器分析条件，欢迎索取！
分析结果如表所示，回收率落在81.9~112.7%范围内，CV%皆小于20，显示此为一快速稳定的检验方法。
实验结果如下：
表1、真菌毒素11项药剂之添加浓度
分析物 | 中文名称 | 添加浓度(ng/g) |
Aflatoxin B1 | 黄曲mei素 B1 | 2.5 |
Aflatoxin B2 | 黄曲mei素 B2 | 2.5 |
Aflatoxin G1 | 黄曲mei素 G1 | 2.5 |
Aflatoxin G2 | 黄曲mei素 G2 | 2.5 |
Ochratoxin A | 赭曲霉毒素 A | 2.5 |
T-2 toxin | T-2毒素 | 5 |
HT-2 toxin | HT-2毒素 | 5 |
Deoxynivalenol | 呕吐毒素 | 25 |
Zearalenone | 玉米赤霉烯酮 | 25 |
Fumonisin B1 | 伏马毒素 B1 | 100 |
Fumonisin B2 | 伏马毒素 B2 | 100 |
表2、谷类样品中11项霉菌毒素之回收率和变异系数
中文名称 | 英文名称 | 黃豆 | 花生 | ||
CV% | R% | CV% | R% | ||
黄曲mei素 B1 | Aflatoxin B1 | 2.3 | 108.5 | 9.0 | 97.5 |
黄曲mei素 B2 | Aflatoxin B2 | 3.7 | 105.0 | 2.4 | 98.2 |
黄曲mei素 G1 | Aflatoxin G1 | 2.6 | 105.4 | 2.0 | 102.9 |
黄曲mei素 G2 | Aflatoxin G2 | 3.4 | 107.4 | 4.0 | 103.0 |
赭曲霉毒素 A | Deoxynivalenol | 4.8 | 100.3 | 1.6 | 103.9 |
T-2毒素 | Fumonisin B1 | 8.1 | 90.3 | 6.1 | 89.0 |
HT-2毒素 | Fumonisin B2 | 13.5 | 81.9 | 5.3 | 96.7 |
呕吐毒素 | HT-2 toxin | 9.1 | 109.7 | 13.4 | 100.4 |
玉米赤霉烯酮 | Ochratoxin A | 2.8 | 101.9 | 3.8 | 106.0 |
伏马毒素 B1 | T-2 toxin | 5.9 | 110.1 | 5.6 | 112.7 |
伏马毒素 B2 | Zearalenone | 8.1 | 108.6 | 5.0 | 94.4 |
*重复性，n=3
结论：
1、本篇以FaTEx-gen SPE柱净化样品，采用液质质（LC-MSMS）的仪器分析方法，检测谷类样品（黄豆及花生）之多重霉菌毒素（黄曲mei素类、赭曲du素A及镰孢菌毒素类）共11项，每次分析时间13分钟，为快速准确的检验方法。
2、 FaTEx-gen萃取净化柱可针对复杂检体基质加强净化，降低基质干扰。
3、 以FaTEx-gen柱检测添加多重毒素标准品之谷类样品（添加浓度：黄曲mei素B1 Aflatoxin B1,黄曲mei素B2 Aflatoxin B2, 黄曲mei素G1 Aflatoxin G1, 黄曲mei素G2 Aflatoxin G2,赭曲霉毒素 A Ochratoxin A：2.5 ng/g，T-2 toxin, HT-2 toxin：5 ng/g；呕吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤霉烯酮 Zearalenone：25 ng/g；伏马毒素 B1 Fumonisin B1,伏马毒素 B2 Fumonisin B2：100 ng/g）回收率落在81.9~112.7%范围内，变异系数皆小于20，为稳定之检验方法。
4、 2015年药典中的中药材：根及根茎类：远志；果实种子类：大枣、肉豆蔻、决明子、麦芽、陈皮、使君子、柏子仁、胖大海、莲子、桃仁、槟榔、酸枣仁、薏苡仁；动物类：水蛭、地龙、全蝎、僵蚕。
