在WB实验中，判断蛋白质表达的阳性结果主要是通过观察和分析经过特定抗体识别及信号放大的目标蛋白质条带来进行的。具体来说，可以从以下几个方面综合考虑：
1、条带清晰度与位置
首先，观察目标蛋白质对应的条带是否清晰可见，且位置与预期一致。理想的阳性结果表现为一条或多条明确、密集、界限分明的条带，出现在预计的分子量范围内。条带的位置可以通过与已知分子量的标准对照（Marker）比较来确定。如果条带位置与Marker对应的目标分子量吻合，则说明抗体确实识别到了目标蛋白质。
2、信号强度
正常情况下，阳性结果的条带信号强度应该明显高于背景噪声，这意味着抗体与目的蛋白之间的特异性结合足够强，足以从复杂的蛋白混合物中区分出来。对于定量分析，可以使用软件量化条带的灰度值或荧光强度，与阴性对照或内参蛋白进行比较，以确定目标蛋白的相对表达水平。
3、重复性验证
科学研究讲究严谨和重复性，单一实验的结果不足以完全证实结论。因此，在初次实验得到阳性结果后，建议进行多次独立实验以验证结果的一致性。同样条件下，如果多次实验都能重现相同的条带位置和信号强度，那么该结果的可信度就大大提高。
4、抗体特异性
使用的一级抗体必须具有高特异性，仅与目标蛋白结合而几乎不与其他无关蛋白交叉反应。可以通过预先做抗体稀释梯度实验、阻断实验等方式，验证抗体的特异性。此外，如果可能的话，采用两种以上的独立抗体对同一样本进行WB实验，如果能得到相同的结果，将进一步加强阳性结果的说服力。
5、对照设置
设置合适的对照是判别阳性结果的另一个重要因素。通常包括：
a.阴性对照：使用不含目标蛋白的样本，或者使用抗体吸附去除目标蛋白的样本，以确认条带出现是由目标蛋白引起的。
b.阳性对照：包含已知高表达目标蛋白的样本，作为实验成功的参照。
c.空白对照：无样本直接加二抗的情况，用于评估背景水平。
d.内参蛋白：如β-actin、GAPDH等，用于校准样品装载量和转移效率，以排除因这些因素造成的假阳性。
通过综合考量以上各方面，结合具体的实验设计和目的，才能准确判断WB实验中蛋白质表达的阳性结果。在整个过程中，严谨的态度和细致的数据记录是非常重要的，它们有助于确保实验结果的真实性和可靠性。
