很多科研人员在血清解冻后会发现浑浊及絮状物质,这时候大家难免会担心:这血清是不是污染了，还能用吗?带着这个疑惑，继续往下看........
血清是血液凝固析出的淡黄色透明液体，是血浆去除纤维蛋白后的混合物，主要成分包括蛋白质、氨基酸、糖类、维生素和多肽（如生长因子、胰岛素、促生长激素）等。血清是细胞培养过程中重要的营养物质，同时也对细胞起到一定的保护作用。
一、常见的几种血清沉淀物
二、血清中的沉淀是什么？
用于细胞培养的各种血清产品中都存在各种类型的沉淀。除了胆固醇和一些蛋白沉淀之外，血清中也会含有纤维蛋白和磷酸钙。虽然沉淀可引起初始问题，但在细胞培养应用方面，沉淀一般不会对血清的性能产生影响。
1、纤维蛋白
血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型。由于在生产过程中,血清采集、过滤(3次0.1 um过滤)和灌装处理都是在低温条件下快速完成，此时血清中纤维蛋白原处于溶解状态。但在解冻之后，血清中纤维蛋白原往往会发生凝集形成肉眼可见的沉淀。
2、磷酸钙
常见的一种沉淀物，会造成血清浑浊,并且在37℃C培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,并且由于布朗运动看上去像在活动,因此经常被误认为是微生物污染。
3、其他成分
血清中的其他成分也会形成沉淀,例如胆固醇和其他蛋白沉淀等。
三、血清沉淀是污染吗？
无论是较大的絮状纤维蛋白还是小黑点样的磷酸钙，都容易被误认为是细菌污染，但其实血清沉淀并不是污染。由于在37℃的温度下培养，会加剧纤维蛋白的析出和磷酸钙颗粒产生，可采用空培方式验证污染，血清按所需比例加入无菌培养基中（不加双抗），放培养箱中过夜，观察空培外观，若为澄清，则血清无污染。还可以通过将血清接种在细菌培养基上进行培养，观察是否存在细菌增殖，并且进行革兰氏染色，用油镜观察直接判断是否为微生物污染。
三、血清沉淀会影响细胞生长吗？
血清出现沉淀是血清的正常特性，各品牌的血清均有沉淀的出现，过于澄清的血清并不代表更高的品质，也可能是在加工过程中提前进行“预老化”，即反复冻融尽可能的去除纤维蛋白原的结果。
血清沉淀的多少与血清的使用效果没有必然关系，血清沉淀并不会影响细胞的正常生长。
四、如何避免过多沉淀出现?
正确的使用和保存血清是避免沉淀产生的关键!
★非必须不用热灭活(热灭活会使血清中部分蛋白质变性析出影响血清品质)
★不宜37℃预热,血清和wan全培养基通常室温预热即可
★避免反复冻融,分装使用
★避免紫外线照射
★避免2-8℃长期保存,分装后-20℃长期保存,按需融解使用
五、血清的正确解冻方法:
应按照逐步解冻的方式解冻血清:从-20°C取出后放置到4℃C融解。在解冻过程中,请注意时不时缓慢摇晃瓶子,减少沉淀的产生。注意直接室温或者水浴融解都容易造成沉淀增多。
注意注意！！！血清融解过程约持续二十小时左右,所以记得在试验前提前融解!
五、去除沉淀的方法?
如果血清中含有沉淀，不建议直接过滤血清。若去除这些絮状沉淀物，可将血清分装至无菌离心管中，以400g离心5min，去除大颗粒沉淀，上清液加入培养基内一起过滤。
六、总结:
综上所述，在我们培养细胞的过程中，血清出现沉淀是正常情况，无论是较大的絮状纤维蛋白还是小黑点样的磷酸钙，都不是污染，且沉淀不会影响细胞的培养效果，可以放心使用。
