在肿瘤治疗领域，化疗作为一种传统和重要的治疗手段，主要是通过化学药物杀灭肿瘤细胞达到治疗的目的。然而，由于其非特异性的杀伤作用引起的不良反应一直是患者和医疗人员的难题。随着基因靶点研究的不断深入，肿瘤治疗的靶向药物应运而生，目标明确的治疗方式给患者带来更好治疗效果的同时也表现出更轻的药物副反应，因此在临床上获得更广泛的应用场景。替尼类药物就是典型的靶向药物代表之一，在非小细胞肺癌、淋巴癌、其他各种实体瘤的治疗中作用显著，临床上对替尼类药物血浆分析也对个性化用药及精准治疗具有重要参考意义。
化合物信息
| 名称 | CAS 号 | 分子量 |
| 阿法替尼 | 850140-72-6 | 485.9 |
| 阿福替尼 | 1869057-83-9 | 568.6 |
| 阿莱替尼盐酸盐 | 1256589-74-8 | 519.1 |
| 阿美替尼 | 1899921-05-1 | 525.6 |
| 贝福替尼 | 1835667-63-4 | 567.6 |
| 伊马替尼 | 152459-95-5 | 493.6 |
| 劳拉替尼 | 1454846-35-5 | 406.4 |
| 奥希替尼 | 1421373-65-0 | 499.6 |
| 吡咯替尼 | 1269662-73-8 | 583.1 |
实验室研究发现，对血浆基质来说，部分初代替尼化合物如伊马替尼，可以通过蛋白沉淀的方法直接进行分析。但对于三代替尼类药物蛋白沉淀方法的回收率较低，很可能无法满足分析需求，因此我们开发了基于 SPE 的前处理方法进行分析，具体方案如下。
前处理
预处理：
200 µL 血浆加入 200 µL 5% 甲酸水溶液，涡旋，待净化；
活化：
96 孔板依次使用 200 µL 甲醇、200 µL 水活化；
上样：
加载预处理后的血浆至活化后微孔板；
淋洗：
650 µL 水溶液淋洗微孔板；
洗脱：
用 100 µL 2% 氨水甲醇溶液洗脱 2 次，涡旋混合；
氮干复溶：
40 ℃ 氮气干燥后，加入 200 µL 初始比例流动相涡旋混合，待检测。
分析
色谱条件
色谱柱：Kinetex C18 (2.1×50 mm, 1.7 μm, 100 Å); P/N: 00B-4475-AN
流动相 A 相：5mM 甲酸铵 - 0.1% 甲酸水溶液
流动相 B 相：0.1% 甲酸甲醇溶液
流速：0.5 mL/min
柱温：40 ℃
进样量：5 μL
梯度程序见下表：
| 时间 (min) | 流速 (mL/min) | B (%) |
| 0 | 0.5 | 20 |
| 0.5 | 0.5 | 40 |
| 2.8 | 0.5 | 70 |
| 3.0 | 0.5 | 100 |
| 4.0 | 0.5 | 100 |
| 4.5 | 0.5 | 20 |
| 6.0 | 0.5 | 20 |
质谱条件
离子源类型：电喷雾离子源（ESI+）
扫描方式：多反应监测正负离子模式（MRM）
喷雾针电压：5500 V
离子源温度：500 ℃
加热器（GS1）：60 psi
辅助加热气（GS2）：60 psi
气帘气（CUR）：40 psi
碰撞气（CAD）：10 psi
结果（药物谱图未能有效呈现）
加标回收实验结果
| 名称 | 加标浓度 ppb | 相对回收% | RSD(N=6) | 基质效应% |
| 阿法替尼 | 10 | 82.3 | 3.7 | +38.3 |
| 阿福替尼 | 6.25 | 56.5 | 3.9 | +2.76 |
| 阿莱替尼盐酸盐 | 5 | 81.5 | 3.5 | +19.1 |
| 阿美替尼 | 12.5 | 72.7 | 4.6 | -7.1 |
| 贝福替尼 | 25 | 63.5 | 3.1 | +7.5 |
| 伊马替尼 | 10 | 82.3 | 3.4 | -0.7 |
| 劳拉替尼 | 10 | 87.9 | 4.6 | +40.1 |
| 奥希替尼 | 10 | 72.3 | 8.4 | -2.7 |
| 吡咯替尼 | 5 | 87.0 | 8.2 | +8.6 |
产品
| 产品 | 规格 | 货号 |
| PCX 96-Wellplate | 5mg/1mL/well, 2/Pk | CX00501-MW |
| Kinetex C18 | 2.1×50 mm,1.7 μm, 100 Å | 00B-4475-AN |
