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细胞凋亡检测试剂盒常用试剂盒类型

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2024/12/23 15:12:02
  细胞凋亡检测试剂盒基于细胞凋亡过程中的特定生物化学变化,通过特定的标记物或染料来区分活细胞、凋亡细胞和死细胞。其原理主要利用凋亡细胞有的生物化学特征,如细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻、DNA的断裂以及线粒体膜电位的改变等。
 
  细胞凋亡检测试剂盒常用试剂盒类型:
 
  Annexin V/PI检测试剂盒:
 
  原理:正常细胞中,PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧。细胞发生凋亡最早期,PS由内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。Annexin V与PS有高度亲和力,因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。PI是一种核酸染料,不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。
 
  类型:根据荧光基团的不同,Annexin V/PI检测试剂盒可分为多种类型,如Annexin V-FITC/PI、Annexin V-APC/PI等。其中,Annexin V-FITC/PI适用于细胞没有自发荧光的情况;而Annexin V-APC/PI则适用于细胞本身需要检测绿色荧光的情况。但需要注意的是,APC和PI的荧光光谱有较大重叠,对检测仪器和技术人员有较高要求。
 
  TUNEL细胞凋亡试剂盒:
 
  原理:细胞发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA,产生大量的粘性3'-OH末端。3'-OH可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化作用下,与荧光染料结合,从而通过荧光显微镜或流式细胞仪直接进行凋亡细胞的检测。
 
  应用:TUNEL细胞凋亡试剂盒可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
 
  Caspase 3/7活性检测试剂盒:
 
  原理:Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族,其中Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的caspase。Caspase 3/7可以催化底物产生黄色的荧光产物,通过测定荧光产物的吸光度来检测Caspase 3/7的活性。
 
  应用:Caspase 3/7活性检测试剂盒可用于检测细胞或组织裂解液中Caspase 3/7的活性,从而反映细胞凋亡的情况。

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