北京盛基瀚森科技有限公司
2013/6/21 11:09:32【作者】 高杰；
【导师】 李兆申； 蔡全才；
【作者基本信息】 第二军医大学， 内科学， 2012， 博士
【摘要】 大肠癌是人类zui常见的恶性肿瘤之一，其发病率位居恶性肿瘤第三位。*统计数据显示，我国大肠癌死亡率居恶性肿瘤第5位，发病率呈逐年上升趋势。针对病因采取有效措施可望明显降低其发病率和疾病负担。然而，大肠癌病因远未得到阐明。大量研究结果表明，维生素D可能是大肠癌的保护因素，但研究结果并不*一致。目前认为维生素D可能通过抑制细胞增殖、促进细胞分化、诱导细胞凋亡等发挥其保护作用，但确切机制仍然不明。探讨维生素D保护机制有助于进一步阐明其与大肠癌发病关系，对于制定大肠癌相关预防策略和措施具有重要意义。目前研究认为，维生素D及其类似物可能通过诱导BMP（骨形态发生蛋白）表达，从而激活BMP-Smad信号通路；BMP-Smad信号通路失活与大肠癌发生、发展关系密切。故推测维生素D可能通过保持BMP-Smad信号通路正常而起到降低大肠癌发病风险的作用。此外，相关研究结果表明，体内维生素D代谢需要细胞色素P450的参与；CYP2R1,CYP24A1,CYP27B1等为CYP450相关的酶类，其与维生素D代谢密切相关；CYP2R1基因突变可导致25-（OH）维生素D3缺乏；CYP24A1和CYP27B1基因多态性与大肠癌的发生有密切关系。故推测CYP2R1基因突变也可能在维生素D与大肠癌关系中发挥重要作用。所以，本研究开展了下面两方面研究以验证上述研究假设。一、BMP-Smad信号通路在维生素D与大肠癌关系中的作用研究（一）研究目的探讨BMP-Smad信号通路在维生素D与大肠癌关系中的作用。（二）研究方法采用病例-病例-对照研究设计。病例组研究对象为大肠癌手术治疗患者，对照组研究对象为健康体检人群。采用电化学发光法检测大肠癌病例和健康人群对照血清中25-羟维生素D3水平，免疫组化方法检测大肠癌病例手术切除标本BMP-Smad信号通路主要成分（包括BMPR1,2和Smad1,5,8以及Smad4）表达情况。通过单因素分析和多因素分析方法，比较BMP-Smad信号通路异常病例人群、BMP-Smad信号通路正常病例人群和健康人群对照血清维生素D差异，从而探讨BMP-Smad信号通路在维生素D与大肠癌发病关系中的作用。单因素分析采用X2检验或t检验，多因素分析采用多元Logistic回归分析方法。（三）研究结果本研究共纳入大肠腺癌病例122例，健康对照128例。年龄、性别在病例组与对照组中的分布均衡可比。1.维生素D与大肠癌关系单因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3、水果、牛奶、咖啡、白肉（包括鸡肉、鸭肉、鱼肉等）是大肠癌的潜在保护因素（P<0.25），吸烟、饮酒、非肠道疾病手术史、红肉（包括猪肉、牛肉、羊肉等）是大肠癌的潜在危险因素（P<0.25）。多因素分析结果表明，血清25-羟维生素D3、牛奶、白肉是大肠癌的保护因素（P<0.05），其相对危险度（95%可信限）分别为0.12（0.05,0.28）（维生素Dzui高值与zui低值比较）、0.43（0.22,0.84）、0.40（0.21,0.78）；饮酒、非肠道疾病手术史、红肉（包括猪肉、牛肉、羊肉等）是大肠癌的危险因素（P<0.05），其相对危险度（95%可信限）分别为5.57（2.51,12.34）、1.96（0.99,3.87）和2.35（1.24,4.48）。2.维生素D、BMPR1A与大肠癌关系BMPR1A阳性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是BMPR1A阳性表达大肠癌的保护因素（Ptrend=0.002），其相对危险度（95%可信限）为0.21（0.08,0.59）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。BMPR1A阴性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是BMPR1A阴性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.03（0.01,0.15）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。BMPR1A阳性表达病例组与BMPR1A阴性表达病例组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3的高低与大肠癌病例的BMPR1A表达状态无统计学（Ptrend=0.054）。上述结果说明，维生素D是大肠癌的保护因素，但其作用不受BMPR1A表达状态影响。3.维生素D、BMPR1B与大肠癌关系BMPR1B阳性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是BMPR1B阳性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.09（0.03,0.25）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。BMPR1B阴性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是BMPR1B阴性表达大肠癌的保护因素（Ptrend=0.007），其相对危险度（95%可信限）为0.15（0.04,0.65）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。BMPR1B阳性表达病例组与BMPR1B阴性表达病例组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3水平的高低与大肠癌病例的BMPR1B表达状态无统计学（Ptrend=0.293）。上述结果说明，维生素D是大肠癌的保护因素，但其作用不受BMPR1B表达状态影响。4.维生素D、BMPR2与大肠癌关系BMPR2阳性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是BMPR2阳性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.04（0.01,0.16）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。BMPR2阴性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是BMPR2阴性表达大肠癌的保护因素（Ptrend=0.006），其相对危险度（95%可信限）为0.24（0.08,0.72）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。BMPR2阳性表达病例组与BMPR2阴性表达病例组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D的高低与大肠癌病例的BMPR2表达状态明显相关（Ptrend=0.008），其相对危险度（95%可信限）为0.10（0.02,0.56）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。上述结果说明，维生素D与BMPR2表达状态存在交互作用，维生素D对于BMPR2阳性表达大肠癌的保护作用强于BMPR2阴性表达大肠癌。5.维生素D、pSmad1/5/8与大肠癌关系pSmad1/5/8阳性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是pSmad1/5/8阳性表达大肠癌的保护因素（Ptrend=0.002），其相对危险度（95%可信限）为0.03（0.02,0.35）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。pSmad1/5/8阴性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是pSmad1/5/8阴性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.12（0.50,0.29）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。pSmad1/5/8阳性表达病例组与pSmad1/5/8阴性表达病例组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D的高低与大肠癌病例的pSmad1/5/8表达状态无统计学（Ptrend=0.687）。上述结果说明，维生素D是大肠癌的保护因素，但其作用不受pSmad1/5/8表达状态影响。6.维生素D、Smad4与大肠癌关系Smad4阳性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是Smad4阳性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.07（0.02,0.27）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。Smad4阴性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是Smad4阴性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.09（0.03,0.28）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。Smad4阳性表达病例组与Smad4阴性表达病例组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3的高低与大肠癌病例的Smad4表达状态无统计学关联（Ptrend=0.131）。上述结果说明，维生素D是大肠癌的保护因素，但其作用不受Smad4表达状态影响。（四）结论维生素D与BMPR2表达状态存在交互作用，维生素D对于BMPR2阳性表达大肠癌的保护作用强于BMPR2阴性表达大肠癌。维生素D对于大肠癌的保护作用不受BMPR1A、BMPR1B、pSmad1/5/8和Smad4表达状态的影响。二、CYP2R1在维生素D与大肠癌关系中的作用研究（一）研究目的探讨CYP2R1表达状态在维生素D与大肠癌关系中的作用。（二）材料与方法采用病例-病例-对照研究设计。病例组研究对象为大肠癌手术治疗患者，对照组研究对象为健康体检人群。采用电化学发光法检测大肠癌病例和健康人群对照血清中25-羟维生素D3水平，免疫组化方法检测大肠癌病例手术切除标本CYP2R1表达情况。通过单因素分析和多因素分析方法，比较CYP2R1阳性表达病例人群、CYP2R1阴性表达病例人群和健康人群对照血清维生素D差异，从而探讨CYP2R1表达状态在维生素D与大肠癌发病关系中的作用。单因素分析采用X2检验或t检验，多因素分析采用多元Logistic回归分析方法。（三）研究结果本研究共纳入大肠腺癌病例72例，健康对照128例。年龄、性别在病例组与对照组中的分布均衡可比。CYP2R1阳性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是CYP2R1阳性表达大肠癌的保护因素（Ptrend<0.001），其相对危险度（95%可信限）为0.07（0.02,0.24）（维生素Dzui高值与zui低值比较）。CYP2R1阴性表达病例组与对照组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3是CYP2R1阴性表达大肠癌的保护因素（P=0.03），其相对危险度（95%可信限）为0.26（0.08,0.88）。CYP2R1阳性表达病例组与CYP2R1阴性表达病例组比较的多因素分析结果显示，血清25-羟维生素D3的高低与大肠癌病例的CYP2R1表达状态无统计学（P=0.531）。上述结果说明，维生素D是大肠癌的保护因素，但其作用不受CYP2R1表达状态影响。（四）结论维生素D与CYP2R1表达状态不存在交互作用。维生素D对于大肠癌的保护作用不受CYP2R1表达状态的影响。 还原
