上海誉贸实业有限公司
2013/9/2 9:38:13中性粒细胞吞噬功能的测定材料:
1试剂:白色葡萄球菌,肝素溶液,甲醇,碱性美蓝染液。
2器材:血红蛋白吸管,凹玻片,载玻片,1mL注射器及26号针头,采血针,酒精棉球等。
中性粒细胞吞噬功能的测定方法:
1菌液的制备
将白色葡萄球菌接种于肉汤培养基中,放37℃温箱内培养12h左右;置100℃水浴中加热10min,杀死细菌,用无菌生理盐水稀释成每毫升6×108个细菌备用。
2试验方法
用红蛋白吸管吸取受试者耳垂或指血40uL,立即加入盛有20uL肝素(浓度为20U/mL)的洁净凹玻片的凹孔内,轻轻搅动混匀,再加上述葡萄球菌菌液20uL充分混匀。然后置入铺有湿纱布的有盖容器内(此容器先放37℃温箱中预温),在37℃温箱中作用30min,其间每隔10min摇匀一次。作用完毕,取1小滴混合液置于洁净无油污的载玻片一端,推成薄片。待干后,用甲醇固定4~5min,碱性美蓝液染2~3min,置油镜下观察。随机计数100个中性粒细胞,分别记录发生吞噬和未吞噬的白细胞数,对有吞噬作用的白细胞,应同时记录所吞噬的细菌数。
3结果表示方法
(1)吞噬细胞(%):即100个中性粒细胞中吞噬有细菌的细胞数;
(2)吞噬指数:将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100,得到每个白细胞吞噬细菌的平均数,即为吞噬指数。
4临床应用:一般多用于病人治疗前后白细胞吞噬指数与百分率的动态变化,作为观察疗效和判断预后的参考指标。
中性粒细胞吞噬功能的测定注意事项:本法可清楚地观察到中性粒细胞的清理作用,但作为科研指标,客观性差,不宜采用。