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荧光素标记蛋白激酶R样内质网激酶抗体IgG

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详细信息

荧光素标记蛋白激酶R样内质网激酶抗体IgG

产品规格:0.1ml/0.2ml
产品价格:询价
抗体来源:Rabbit OR Mouse
货 期: 现货
性 状: Lyophilized or Liquid
浓 度: 1mg/1ml 
亚 型: IgG
贮 存: 贮存于-20℃.
产品用途:科研实验,用于免疫组化实验,WB实验,相应的标记抗体有HRP标记抗体,FITC标记,BIO等。

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荧光素标记
A、 异硫氰酸荧光素(FITC)标记FITC标记抗体的原理是在碱性条件下,FITC 的异硫氰基能与IgG的自由氨基结合,形成IgG与荧光素的结合物。FITC是zui常用的荧光素,其次选用TRITC(四甲基异硫氰酸罗丹明)。FITC和TRITC是常用的双标记组合。肾上腺髓质素抗体其标记步骤如下:
a. 以碳酸盐缓冲液(PH9.3,Na2CO3 8.6g,NaHCO3 17.3g,蒸馏水1000ml)调整抗体浓度至10mg/ml。
b. 取5ml抗体溶液置于10ml小烧杯中。
c. 称取1mg FITC溶于0.2ml DMSO中,待溶解后立即缓慢滴加于抗体液内,边加边轻搅;其后室温避光作用2小时。
d. 将交联物经Sephadex G25或G50柱层析除去游离的荧光素;分管收集*峰为标记的抗体。
e. FITC的结合物质量鉴定IgG量(mg/ml)=(OD280-OD495×0.35)/1.4F/P=2.87×OD495/(OD280-OD495×0.35),一般说,FITC对抗体的摩尔比为3:1时适合于组织切片染色,为5-6:1时适合于细胞悬液染色。以标记抗体染色各种抗原,测定其特异性染色滴度和非特异染色的程度。
f. 标记抗体的保存:宜保存于4℃,加NaN3防腐。

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