上海誉贸实业有限公司
2014/2/11 10:21:15
盐析法抗体纯化实验操作
取1X ml血清加1X ml生理盐水，于搅拌下逐滴加入2X ml饱和硫酸铵，硫酸铵的终饱和度为50%。
↓4℃，3h以上，使其充分沉淀
离心（3000rpm），20min，充上清，以x ml生理盐水溶解沉淀，再逐滴加饱和硫酸铵x/2ml。
↓置4℃3h以上，[此时，（nh4）2so4的饱和度为33%]
重复上述第二步过程1～2次。末次离心后所得沉淀物为γ-球蛋白，以0.02% mol/l pH7.4pbs溶解至x ml装入透析袋。
↓对PBS充分透析、换液3次，至萘氏试剂测透析外液无黄色，即无NH4+为止。
取透析袋内样品少许作适当倍数稀释后，以752型紫外分光光度计测定蛋白含量。
