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酶标试剂的说明和应用

上海誉贸实业有限公司

2014/4/9 10:31:41

    酶标抗体仅需适当底物和普通光学显微镜即可高度敏感地检出抗原。由于信号是通过吸收光的差异,而非发射光来检测,底物的不溶性显色产物分布在酶所在位置的周围区域,因此这种检测方法尚不能达到荧光技术的分辨率。

 

    酶反应后出现沉淀,在酶所处位置周围产生不溶性显色产物,通过底物的显色来检出酶标试剂所处位置。多种酶及底物可供选择,但近年来多选用辣根过氧化物酶(HRP)及底物二氨基联苯胺(DAB)来进行培养细胞的染色。HRP可与抗Ig抗体、蛋白A、蛋白G、亲和素或链霉亲和素等共价偶联,其中任何一种二级试剂均可用于检测与目标抗原结合的一抗的位置。

 

        细胞染色法如果实验要求操作简单,用同一条件观察大量样品,用酶联检测法较好;如实验要求高分辨率,则应用荧光素标记检测法;共聚焦显微镜比相差显微镜具有更高的分辨率。如考虑敏感性,选用共聚焦显微镜法,再依次为酶联法及荧光显微镜法。如考虑到价格因素,则酶联法为。

 

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