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透析袋预处理方法

上海源叶生物科技有限公司

2010/6/29 18:59:27

透析袋预处理方法

1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋
2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTAPH*8.0)中将透析袋煮沸10min
3)将透析袋用蒸馏水*漂洗
4)将透析袋置1mmol/L EDTAPH*8.0)中煮沸10min
5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作
6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。

用过的透析袋保存前需要怎么处理?

      用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置50%乙醇中保存即可;用完以后,要*洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建议前两种保存比较好!

透析和透析袋的处理

     透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析 袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出液""透析液"。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析 的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。

透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的zui多的还是用纤维素制成的透析膜, 目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的zui小分子量,缩写为MwCO)通常为1 万左右。商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm50 mm不等。为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。

   透析袋的处理:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,zui后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水*清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。从此 时起取用透析袋必须戴手套。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
   
新透析袋 如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内 将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些, 可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。

   
检查透析效果的方法是:用1 BaCl2检查(NH4)2SO4,用1 AgNO3 检查NaClKCl

透析膜前处理方法如下

1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中 15 min 泡软。
2.
浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至 80,一边搅拌至少 30 min
3.
换到 10 mM Na2·EDTA 中浸泡 30 min,以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。
4.
再用 80 蒸馏水洗 30 min,然后换到 20% 酒精中,放在 4 冰箱中保存。

 

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