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Gibco热灭活胎牛血清

上海慧颖生物科技有限公司 >> 进入商铺

2016/4/27 11:19:31

上海慧颖生物提供人源细胞STR鉴定服务,价格很便宜,800元/株,量大更优,提供具体的实验报告。除人源细胞(ATCC推荐的11个位点+9个多态位点)鉴定外,还提供小鼠品系鉴定(SNP方法)以及小鼠细胞STR分型鉴定(9个STR位点+两个人源污染位点)。

慧颖生物有10年SNP分型经验,已经完成的SNP分型数据近千万,采用LDR技术发表的SCI论文数百篇,并且有3篇发表于*期刊Nature Genetics上。具有市场竞争力的价格!我们公司还有SNP分型服务;STR分型;分子遗传学、分子生物学服务(SNP/STR分型、CNV检测、测序、Real time qPCR、microRNA检测、MCF基因表达分析系统、定制PCR array)

TUNEL细胞凋亡检测 (TUNEL Apoptosis Assay)是一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。

基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,zui后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞。

技术步骤

1. 材料与试剂 (以Promega试剂盒为例),包括:

(1)生物素标记的-dUTP(Biotin-dUTP)或地高辛标记的-dUTP(Digoxingeningll-dUTP) 1 nmol/µL

(2)TdT酶(25U/μL)

(3)反应缓冲液

(4)洗涤缓冲液

(5)异硫氰酸荧光素(FITC)标记的亲合素或链霉亲合素(2.5µg/mL)或抗地高辛抗体(1︰30)

(6)PI染液(含PI 5µg/mL及无DNA酶活性的RNA酶0.1%)

(7)PBS缓冲液

(8)塑料盖玻片

2. 样品

(1)悬浮生长培养细胞的甩片或涂片

(2)贴壁生长的培养细胞

(3)冰冻切片

(4)常规石蜡切片

3. 操作方法

(1)固定:培养细胞的制片或冰冻切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后,用80%酒精再固定2h(-20℃)。常规4%中性福尔马林固定、石蜡包埋之切片进行脱蜡、水化。

(2)洗涤:玻片浸入PBS缓冲液,摇床上洗涤5min,三次。

(3)反应:洗涤后的玻片用吸水纸吸干细胞或组织周围水分,按50μl/cm2滴加反应液(每50μL反应液含TdT酶0.5μL,标记的-dUTP 1μL),使反应液均匀地覆盖于所有细胞或组织切片上,盖上塑料盖玻片,置湿盒中,37℃孵育1h。

(4)终止反应:去掉塑料盖玻片,将玻片置盛有洗涤缓冲液的染色缸内,洗涤两次,每次5min。

(5)FITC标记:洗涤后的玻片用吸水纸吸去细胞或组织周围水分,按50μl/cm2滴加FITC反应液(含FITC 2.5μg/mL),室温下避光孵育10min。

(6)洗涤:将玻片置于洗涤缓冲液内,洗两次,每次5min。

(7)PI复染:将玻片置于盛有PI染液的染色缸内,室温下避光染色30min。

(8)封片:用盖玻片直接盖在含PI染液的玻片上,亦可用无色指甲油涂于盖玻片四周边缘,置暗盒中,尽早镜检观察。

4. 结果判定:用荧光显微镜观察,选用蓝色激发光(波长488nm),所有的细胞核均被PI着色,显示出红色荧光,而凋亡细胞被特异地标记上FITC,显示出黄绿色荧光。

应用领域

细胞凋亡(apoptosis)的分析方法,细胞凋亡有一项重要的特征为细胞内的DNA会碎裂成片段(DNA fragmentation),TUNEL可以有效的去探测DNA片段的产生。

服务周期

交货时间: 15~20天

客户须知(对材料的要求、注意事项)

结果提供: 正常和阳性对照玻片及其1张数码照片,剩余石蜡块,检测报告;

样本要求:取材保持组织新鲜(组织块以小于2cm×1.5cm×0.3cm为宜),立即放入固定液(固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液,体积为组织块的10倍以上)中,避免干燥;对于有血迹的样本,可用PBS液或生理盐水冲洗后直接放入固定液中;经固定后的样本必须在48小时内处理。

慧颖生物专业血清10年,我们不生产血清,我们只是高品质动物血清的搬运工

Gibco热灭活胎牛血清,热卖货号:10082-147(500ML)和10100-147(500ML)全程干冰运输,当天即可发货,更多礼品相送

产品名称    货号    来源    规格    市场价格

胎牛血清FBS     10270-106   SOUTH AMERICA   500ML   3200

胎牛血清FBS     10270-106   SOUTH AMERICA   500ML   3200

胎牛血清FBS     c2027050    SOUTH AMERICA   500ML   2600

优等胎牛血清FBS     10437-028   Mexico 500ML   3200

优等胎牛血清FBS     10437-028   Mexico 500ML   3200

优等胎牛血清FBS     10437-028   Mexico 500ML   3200

优等胎牛血清FBS     10099-141   AUSTRALIA   500ML   7000

优等胎牛血清FBS     10099-141   AUSTRALIA   500ML   7000

优等胎牛血清FBS     10099-141   AUSTRALIA   500ML   7000

特级胎牛血清FBS     16000-044   USA 500ML   5800

特级胎牛血清FBS     16000-044   USA 500ML   5800

特级胎牛血清FBS 16000-044  USA 500ML   5800

优等胎牛血清FBS 26140-079  USA 500ML   3600

优等胎牛血清FBS     26140-079   USA 500ML   3600

热灭活胎牛血清FBS  heat inactivated 10082-147  USA 500ML   5600

热灭活胎牛血清FBS  heat inactivated     10100-147   AUSTRALIA   500ML   14239

热灭活胎牛血清FBS  heat inactivated 10100-147  AUSTRALIA   500ML   14239

超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS   16250-078   USA 500ML   6000

透析胎牛血清Dialyzed FBS    264000-044  USA 500ML   6800

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS  12676-029   USA 500Ml   6800

新生牛血清New born calf serum   16010159    New Zealand 500ML   1035

马血清Horse Serum   16050-122   New Zealand 500ML   909

热灭活马血清Heat-Inactivated Horse Serum    26050-088  New Zealand 500Ml   1069

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