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NR-E10028 猫白细胞介素-2(IL-2) (Feline IL-2 ELISA Kit) ELISA 试剂盒

型号
NR-E10028

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Elisa试剂盒,抗体、多肽、蛋白等生物制品,实验室耗材,实验室仪器,实验室设备

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详细信息

 

实验原理:

本试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中猫白细胞介素-2的水平。用纯化的猫白细胞介素-2抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入猫白细胞介素-2,再与猫白细胞介素-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的猫白细胞介素-2呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猫白细胞介素-2浓度。

前沿简介:

白细胞介素-2IL-2)是属于白介素家族,在免疫应答过程中起着关键作用,通常是T淋巴细胞受到抗原刺激时产生的。IL-2与其受体IL-2R的反应能够刺激抗原T细胞的生长、变异和存活,此外IL-2在免疫调节细胞的发育和存活、诱导细胞死亡过程中起着重要作用。

名称:猫白细胞介素-2(IL-2)  (Feline IL-2 ELISA Kit) ELISA 试剂盒
样品用途:此试剂盒只用于猫白细胞介素-2的检测
样品类型:血浆、血清、细胞培养上清液
灵敏度:
7.5pg/mL  
检测范围:156.25-10000 pg/ml 
分析时间:4h
规格:96T
试剂盒保存温度:2-8℃

实验操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37溶解);试 剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.
加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.
弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加 检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜,37反应60分钟。
3.
温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.
每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37反应60分钟。
5.
温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.
依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.
依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.
用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。

 

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