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牛细小病毒（BPV）试剂盒（荧光-PCR法
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上海沪峥生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的企业，自公司成立以来，每年的销售额保持高速增长，企业规模不断扩大，生产加工和销售的产品包括ELISA试剂盒，标准品和对照品，医药中间体，培养基，各种化学试剂，生化试剂等实验耗材等万余种。公司拥有专业的技术研发团队，长期力于ELISA试剂盒、生物试剂的研发，为客户提供引物设计与合成、免疫组化、PCR定量服务等一系列实验代测服务。上海沪峥严格遵守“质量用心、客户用心、技术有心、服务用心”等企业原则。公司产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域，并销往全国各地。公司客户遍布国内各大学、医院、研究所、卫生防疫、制药公司、生物公司等单位，得到广大客户的*好评。我们的宗旨是“为客户提供*质的产品和服务”。 上海沪峥生物以技术为核心并拥有完善的市场营销体系、现代化管理体系和专业化物流配送系统，较大程度满足国内外生命科研人员的产品需求。公司专门设立优质完善的客服中心及技术中心，*时间为客户解决技术支持、产品跟踪以及售后等相关问题，旨在生命科学和医学科学研究领域创造具有竞争力的自主知识产权品牌产品。欢迎社会各界朋友前来洽谈业务，共创辉煌！
详细信息
牛细小病毒（BPV）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
【产品名称】
通用名称：牛细小病毒（BPV）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
Name：Bovine Parvovirus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】50T/盒
【预期用途】牛细小病毒病是由牛细小病毒感染引起的一种接触性传染病。该病主要临床特征是母牛生殖机能障碍和犊牛呼吸道、消化道疾病。该病毒主要经口和空气等途径传递。
本试剂盒适用于检测腹泻粪便、肠系膜淋巴结、肝脏、肾、肺、肝、脑、睾丸、胎盘和淋巴结、全血等样本中的牛细小病毒，用于牛细小病毒感染的辅助诊断。
【检验原理】
本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对牛细小病毒基因组特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对牛细小病毒基因组的 DNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
包装规格 | 50T/盒 |
BPV 反应液 | 500μL×2 管 |
酶液 | 50μL×1 管 |
BPV 阳性质控品 | 50μL ×1 管 |
阴性质控品 | 250μL ×1 管 |
不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】
捕杀牛：取肺部病变组织，5g；活牛：用灭菌棉拭子沾取牛气管或眼鼻分泌物，然后置于装有 0.5mL 生理盐水的离心管中。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。
1. 样品处理（样本处理区）
取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g，手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中， 8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。核酸提取
1.3 核酸提取采用核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 试剂配制（试剂准备区）
根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 10份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
55℃ | 30sec | 是 |
1. 结果分析判定
1.1 结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
1.2 结果判断
阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；
可疑：检测通道 35<Ct 值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为 35<Ct 值≤38，且曲线有明显的增长曲线， 判定为阳性，否则为阴性；
阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
2. 质控标准
阴性质控品：Ct>38 或无 Ct 值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
牛腺病毒3型(BAV-3)试剂盒(荧光-PCR法)【注意事项】
Ø 所有操作严格按照说明书进行；检验过程中，参照《GB/T 27403 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测》的规定进行。
Ø 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；
Ø 反应液应避光保存；
Ø 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
Ø 使用一次性吸头、一次性手套和各区工作服；
Ø 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
Ø 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
Ø 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全 通则》进行处理。
沪峥PCR优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保
所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
