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转基因水稻LLRICE62试剂盒(荧光-PCR法)
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经销商上海沪峥生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的企业,自公司成立以来,每年的销售额保持高速增长,企业规模不断扩大,生产加工和销售的产品包括ELISA试剂盒,标准品和对照品,医药中间体,培养基,各种化学试剂,生化试剂等实验耗材等万余种。公司拥有专业的技术研发团队,长期力于ELISA试剂盒、生物试剂的研发,为客户提供引物设计与合成、免疫组化、PCR定量服务等一系列实验代测服务。上海沪峥严格遵守“质量用心、客户用心、技术有心、服务用心”等企业原则。公司产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域,并销往全国各地。公司客户遍布国内各大学、医院、研究所、卫生防疫、制药公司、生物公司等单位,得到广大客户的*好评。我们的宗旨是“为客户提供*质的产品和服务”。 上海沪峥生物以技术为核心并拥有完善的市场营销体系、现代化管理体系和专业化物流配送系统,较大程度满足国内外生命科研人员的产品需求。公司专门设立优质完善的客服中心及技术中心,*时间为客户解决技术支持、产品跟踪以及售后等相关问题,旨在生命科学和医学科学研究领域创造具有竞争力的自主知识产权品牌产品。欢迎社会各界朋友前来洽谈业务,共创辉煌!
转基因水稻LLRICE62试剂盒(荧光-PCR法)
通用名称:转基因水稻LLRICE62试剂盒(荧光-PCR法)
Name :LLRICE62 derived ingredients Detection Kit(Real-Time PCR Method)
【包装规格】50T/盒
【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,设计一对马源性成分(Horse)保守区特异性引物结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对马源性成分(Horse)保守区的DNA进行体外扩增检测,从而达到快速检测之目的。
转基因水稻LLRICE62试剂盒(荧光-PCR法)【试剂组成】
名 称 | 规 格 |
酶液 | 50μL×1 管 |
Horse反应液 | 500μL×2 管 |
Horse阳性质控品 | 50μl ×1 管 |
阴性质控品 | 250μl×1 管 |
注:
1) 不同批号试剂不能混用。
2) 试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次。有效期 12 个月。
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycle、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g。
根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 10份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:
步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
55℃ | 30sec | 是 |
结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。
a) 检测通道 Ct 值≤35,有 FAM 荧光信号检出,并出现典型的扩增曲线,判断样品为阳性。
b) 当 30<Ct 值≤35 时,且有典型的扩增曲线时,则需重复实验。再次扩增后检测体系的Ct 值仍≤35,且有典型的扩增曲线,则判定该样品含有相应的动物源性成分。当再次扩增后,检测体系 Ct 值>35,或无典型的扩增曲线,则判定该样品不含相应的动物源性成分。
6. 质控标准
a) 空白对照:无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35,未出现典型的扩增曲线。
b) 阴性对照:无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35,未出现典型的扩增曲线。
c) 阳性对照:有 FAM 荧光信号检出,并出现典型的扩增曲线,Ct 值<30。
d) 以上应同时满足,否则本次实验无效。
转基因水稻LLRICE62试剂盒(荧光-PCR法)【注意事项】
Ø 所有操作严格按照说明书进行;检验过程中,参照《GB/T 27403 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测》的规定进行。
Ø 试剂盒内各种组分使用前应自然融化,混匀并短暂离心;
Ø 反应液应避光保存;
Ø 反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
Ø 使用一次性吸头、一次性手套和各区工作服;
Ø 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
Ø 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
Ø 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全 通则》进行处理。
沪峥PCR优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保
所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
P CR实验概述