- 面议
起订量：
小鹅瘟病毒PCR检测试剂盒说明书
- 型号
该企业相似产品
山东蓝都生物科技有限公司成立于2015年，秉承“品质至上、客户第一、追求ZHUOYUE”的生产服务宗旨，“自强不息、艰苦奋斗、务实创新、追求ZHUOYUE”的精神，不忘初心，目标坚定，做BEST产品，服务于行业客户。食品安全检测事业部现有保健品类、激素及类固醇类、重金属类、喹恶啉类、消炎镇痛类、水产违禁类、牛羊马类、农药DU品类、禽病类、生理活性物、体外诊断IVD炎症、细菌含传染病类等多个品种。
主要产品有真菌毒素免疫亲和柱、真菌毒素嵌合酶联免疫检测试剂盒、真菌毒素胶体金定性检测卡、量子点定量检测卡、食品安全定量/定性检测箱、食品安全抗原及单克隆抗体、单克隆及多克隆抗体制备试剂耗材及相关仪器、食品安全与动物疫病类抗原及单克隆抗体等约1200种，部分产品已经出口到德国、俄罗斯、伊朗、英国、美国等多个国家。
地址：山东省滨州市国家经济技术开发区黄河二路376号
邮编：256600
详细信息
小鹅瘟病毒PCR检测试剂盒说明书
【用途】 用于小鹅瘟病毒核酸的检测。
【试剂】
编号 | 20T | 50T | 保存 | |
裂解液 | 4mL | 10mL | 室温 | A盒 |
无水乙醇 | 4mL | 10mL | 室温 | |
去蛋白漂洗液 | 12mL | 28mL | 室温 | |
洗涤液 | 32mL | 77mL | 室温 | |
洗脱液 | 2mL | 5mL | 室温 | |
蛋白酶K | 0.2mL | 0.5mL | -20℃ | B盒 |
PCR反应液 | 200μL | 500μL | -20℃ | |
引物 | 40μL | 100μL | -20℃ | |
阳性对照 | 30μL | 30μL | -20℃ | |
阴性对照 | 300μL | 300μL | -20℃ | |
DL2000 DNA Marker | 20μL | 50μL | -20℃ | |
【小鹅瘟病毒PCR检测试剂盒说明书操作步骤】
1.样本前处理及核酸提取
样本前处理：
取适量病料心、肝、肠等组织，于灭菌研钵充分研磨，用PBS按照1：3体积稀释成均匀乳剂，经10 000rpm离心3 min。
核酸提取：
(1)取200μL上述样本离心后上清液和10μL蛋白酶K加入一只新的1.5mL离心管,然后加入200μL裂解液，剧烈振荡。(蛋白酶K开盖使用后建议存于2-8℃)混匀5～10秒。
(2)56℃温浴10分钟。
(3)在上述离心管中加入200μL无水乙醇，充分振荡混匀5～10秒。
(4)将步骤3中混匀的液体转移至一只套有收集管的纯化柱上，10 000rpm离心1分钟，弃去套管内液体。
(5)将500μL去蛋白漂洗液加入纯化柱上，10 000rpm离心1分钟，并弃去套管内液体。
(6)将700μL洗涤液加入纯化柱上，10 000rpm离心1分钟，并弃去套管内液体。
(7)可选：重复步骤（6）。
(8)再将纯化柱放回接液管上，13 000rpm离心1分钟。
(9)将纯化柱移到一只干净的1.5mL离心管中。
(10)向离心柱内加50μL洗脱液，室温静置1分钟后12 000rpm离心1分钟，弃纯化柱，离心管内液体中含有基因组DNA。提纯的基因组DNA如果不立即使用，请保存于-20℃。
2. PCR加样体系（总体系20 μL）：将下列试剂加入PCR反应管中。
PCR反应液 引物 | 10μL 2.0μL |
模 板 | 8μL |
（注：阴、阳性对照设立，由试剂盒提供的标准品直接替换“模板”即可。）
3. 反应程序
94℃预变性 | 5min |
94℃变性 | 30s |
51℃退火 | 30s 共34个循环 |
72℃延伸 | 30s |
72℃延伸 6min | |
4℃ | 5min |
4. 电 泳
配制1%琼脂糖凝胶，取PCR产物5uL，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加3μl DL2000 DNA Marker，在120v-130v 电压下，1×TAE液中电泳15-20min，在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
在372b左右位置出现扩增带，核酸检测为阳性（如图）。
在372b左右位置未出现扩增带，核酸检测为阴性 。
1.B盒使用之前请*溶解并离心数秒后使用，蛋白酶K开盖使用后建议保存于2-8℃。
2 反复冻融试剂将降低检测灵敏度，尽量减少反复冻融。
3 为避免样本间的交叉污染，模板最后加，加模板时先加阴性对照，再加检测样品，最后加阳性对照，有条件的实验室加模板的移液器应与加其它组份的移液器分开。
4 上机前注意检查确保反应混合液内无气泡，且反应管盖紧。
【生产企业】
企业名称：山东绿都生物科技有限公司
生产地址：山东省滨州市经济开发区黄河二路169号绿都生物工程高科技园
【有效期】本制品有效期为1年，生产日期见包装内侧。
仅供兽医诊断使用
长期提供原核、真核蛋白表达构建服务
长期 提供抗原偶联、 HRP、生物素、糖基化、亲和素、FITC等偶联标记多肽、抗体、抗原、蛋白等服务
