DIGE技术实验服务

实验技术简介:

DIGE一双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis ,2D-DIGE)，是在传统双向电泳的基础上发展而来的新型蛋白质组学定量技术，其分离蛋白质混合的原理与双向电泳是一致的， 主要利用蛋白质的等电点和分子量的差异来分离蛋白质混合物，同时应用荧光染料的灵敏度及内标的使用等技术，使其在定量蛋白质组学的研究中效果明显优于传统双向电泳。DIGE使用的荧光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它们能与蛋白质的赖氨酸侧链氨基反应而使蛋白质被标记，被标记蛋白质的等电点和分子量几乎不受影响，等量混合标记好的蛋白质后进行双向电泳，不同凝胶之间可以

通过cy2内标匹配，消除凝胶之间的差异，蛋白质表达量的变化则通过cy3和cy5不同荧光的强度来体现。

与常规双向电泳后，银染或考染胶相比，DIGE具有以下优势:

1、灵敏度高，Z低可检测到125pg的蛋白质;

2、高效性，同一块凝胶上可以电泳两个样品，减轻了工作量;

3、线性范围更广，动态范围高达10-5;

4、定量精确,采用内标消除了凝胶与凝胶之间的实验误差，显著提高了实验的精确度和可重复性;

5、统计学分析，ImageMaster7.0 (DIGE) 软件可以得到统计学可信的结果，降低了操作者之间的偏差。

DIGE技术服务流程

DIGE技术服务内容

1、样本制备与定量; .

2、荧光标记;

3、双向电泳和图片分析;

4、DIGE实验报告提交。

送样须知:

1、技术咨询:在您开展实验之前，本公司将为您竭诚提供有效的DIGE实验设计方案。

2、为了保证DIGE实验能顺利进行，样品须液氮或干冰保存寄送，

注:样本应避免各类污染和反复冻融。

实验报告内:

1、DIGE荧光电子图片;

2、蛋白质点定量分析结果，包括差异点号码、差异倍数、pI和MW等;

3、完整实验报告，包括实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。