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蛋白双向(2-D)电泳实验服务
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经销商实验技术简介:
双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS -PAGE的组合,即*行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE (按照分子大小), 经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。
实验原理:
蛋白双向(2-D)电泳实验服务是目前为止zui有效、使用最多的蛋白分离方法。差异蛋白质组学是在双向电泳后用考麻斯亮蓝、银离子或荧光染料等将蛋白斑点染色,然后比较差异。本公司在各类微生物、培养细胞、动植物组织(如动物软硬组织、体液、植物种子、叶子等)、亚细胞组分的双向电泳分离及后续质谱鉴定中均有丰富的经验。
蛋白双向(2-D)电泳实验服务技术服务项目:
1.根据客户需求定制蛋白质组学实验方案
2.各种规格胶条长度的双向电泳
3.考麻斯亮蓝染色、银离子染色; .
4.DIGE系统双向电泳。
5.图像分析
6.切胶质谱分析
服务说明:
1.我们的实验只对我们制作的样本负责,如您提供的是直接做等点聚焦的样本,我们不敢保证蛋白的有效分离。
2.蛋白质组学实验的总体实验流程;
实验流程:
1、样本制备
2、固相预制胶条水化
3、第--向等电聚焦(IEF)
4、胶条平衡→第二向SDS-PAGE电泳
5、凝胶染色检测
6、图片扫描
双向电泳服务结果提交:
1、实验的试剂耗材、仪器设备、操作过程--份;
2、实验结果凝胶扫描图片;
3、电泳凝胶(可收费干胶) ;
4、剩余样本。
说明:
1.样品制备指可用通常程序处理的原样,如样品较特殊(需要去除核酸、盐等杂质或需要浓缩),价格将视进一步处理的难度和耗材用量另行商定;
2.建议客户提供的原样(组织、细胞、菌体等)湿重不少于100mg如直接提供蛋白提取物,则浓度不少于4ug/ul,总量不少于5mg;
3.样品的还原和烷基化过程一般在制备时进行;
4.图象处理与切胶主要是手I操作成本。
客户方需提供:
细胞,组织或蛋白。
实验周期:
5-10天
可提供技术支持: .
1、从现有的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等方法,获得带有目的基因的DNA片段。
2、在体外,将带有目的基因的外源DNA片段连接到具有选择标记的载体分子上,形成能够自主复制的重组DNA分子。
3、将重组DNA分子转移到适宜的受体细胞,并使其一起增殖。
4、从大量的细胞繁殖群体中,筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆。
5、由筛选出来的受体细胞克隆,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究使用。
6、将分离到的目的基因克隆到表达载体上,导入受体细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。