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高效液相色谱仪校准
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详细信息
1、高效液相色谱仪校准范围
适用于配有紫外-可见光检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器、示差折 光率检测器和蒸发光散射检测器的液相色谱仪的检定、后续检定和使用中检查。
2、概述
液相色谱仪（以下简称仪器）是由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数 据处理系统等部分组成的分析仪器，图1是其组成的方框图。液相色谱仪根据样品中各 组分在色谱柱内固定相和流动相间分配或吸附等特性的差异，由流动相将样品带入色谱柱中进行分离，经检测器检测并通过数据处理系统记录色谱图，依据各组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高行性定性和定量分析）定向。
3、计量性能要求
3. 1输液系统
3. 1. 1输液管路接口紧密牢固，在规定的压力范围内无泄漏。
3. 1. 2泵流量设定值误差Ss和流量稳定性Sr应符合表1的要求。
3. 1.3梯度最大允许误差土3%。
表1泵流量设定值误差Ss和稳定性Sr的指标要求
泵流量设定值/ (mL/min) | 0. 20. 5 | 0. 6 — 1. 0 | 大于1.0 |
测量次数 | 3 | 3 | 3 |
流动相收集时间/min | 20~10 | 10~5 | 5 |
泵流量设定值最大允许误差Ss | ±5% | ±3% | ±2% |
泵流量稳定性Sr | 3% | 2% | 2% |
注：①最大流量的设定值可根据用户使用情况而定； ②对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量， 流动相的收集时间则根据情况适当缩短或延长。 | |||
3.2柱温箱
柱温箱温度设定值最大允许误差：士2 °C。
3. 2. 2柱温箱温度稳定性：不大于1 °C/h。
3.3检测器
仪器的检测器的主要技术指标见表2。
表2液相色谱仪检测器的主要技术指标
^测器 项 | 紫外-可见光检测器 二极管阵列检测器 | 荧光检测器 | 示差折光率检测器 | 蒸发光散射检测器 |
基线噪声① | M5X10T AU | C5X1O-4 FU | <5X10-7 RIU | <1 mV |
基线漂移 | 《5X10—3 AU/30 min | W5Xl()f FU/30 min | ^5X10~6 RIU/30 min | W5 mV/30 min |
最小检测浓度 | W5 X 10-8 g/mL 棊-甲醇溶液 | <5X10-9 g/mL 蔡-甲醇溶液 | W5 X 10~6 g/mL 胆固醇-甲醇溶液 | W5 X IO-6 g/mL 胆固醇-甲醇溶液 |
波长示值最大 允许误差 | + 2 nm | + 5 nm | —- | — |
波长重复性 | W2 nm | W2 nm | 一 | 一 |
线性范围 | 优于io3 | 优于103 | 优于103 | 一 |
注：①若仪器的输出信号用mV或V表示，注意查看仪器说明书或仪器标牌标明的其与AU (FU)的换算关系；若无特殊标明通常可按照1 V=1AU (FU)进行换算。 | ||||
3.4整机性能
仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示，指标要求见表3。
表3液相色谱仪整机性能指标要求
^测器 项八、 | 紫外-可见光检测器 二极管阵列检测器 | 荧光检测器 | 示差折光率检测器 | 蒸发光散射检测器 |
定性重复性 | Ml. 0% | <1. 0% | <1. 0% | W1. 5% |
定量重复性 | <3. 0% | <3. 0% | <3. 0% | <4.0% |
、高效液相色谱仪校准通用技术要求
仪器外观
仪器上应有仪器名称、型号、制造厂名、产品系列号、出厂日期等内容的标牌，国 产仪器应有制造计量器具许可证标志。
4.2仪器电路系统
仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键等功能正常，指示灯灵敏, 显示器清晰。
5、计量器具控制
计量器具控制包括：检定、后续检定和使用中检查。
5. 1检定条件
5. 1. 1环境条件
5.1. 1.1检定室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。
5. 1. 1.2室温（15〜30）°C,检定过程中温度变化不超过3 °C （对示差折光率检测器, 室温变化不超过2 °C）,室内相对湿度20%〜85%。
5. 1.1.3仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地 良好。
5. 1.1.4 电源电压为（220 + 22） V,频率为（50士0. 5） Hz。
5. 1. 2检定设备
5. 1.2. 1秒表：最小分度值不大于0. 1 s o
5. 1. 2. 2分析天平：最大称量不小于100 g,最小分度值不大于1 mg。
5. 1. 2. 3数字温度计：测量范围为（0〜100）°C,最大允许误差为土 0.3 °C。
以上器具需经计量校准/检定合格。
5. 1. 3有证标准物质：
萘-甲醇溶液标准物质：认定值为1.00 *10-4g/mL,扩展不确定度小于4% ，k=2
萘-甲醇溶液标准物质：认定值为1.00 *10-7g/mL,扩展不确定度小于4% ，k=2
甲醇中胆固醇溶液标准物质：认定值为200μg/mL，扩展不确定度小于2% ，k=2
甲醇中胆固醇溶液标准物质：认定值为5.0μg/mL，扩展不确定度小于5% ，k=2
胆固醇纯度标准物质：认定值为99. 7%,扩展不确定度小于0. 1%, k=2
5. 1.4其他要求
5.1. 4. 1检定用试剂：色谱级甲醇，纯水，分析纯的丙酮和异丙醇，紫外分光光度计、溶液标准物质等。
5.1. 4. 2 注射器：10 ptL, 50 M 和 10 mL 各一支。
5. 1. 4. 3 容量瓶：50 mL, 10 个。
