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微量cfDNA简化基因组甲基化测序

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深圳市易基因科技有限公司

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深圳市易基因科技有限公司(简称易基因,E-GENE Co.,Ltd.)专注表观组学十余年,以“表观遗传学科学研究与临床应用”为愿景,依托高通量测序技术和云数据分析平台。为医疗机构、科研机构、企事业单位等提供以表观遗传学技术为核心的多组学科研服务及解决方案,全面覆盖针对生命科学基础研究、医学及临床应用研究等内容。


易基因专注表观组学十余年,多组学科研服务。技术团队在国际上LHC-BS、HMST-seq、ChIP-BS、cfDNA-TBS等甲基化、羟甲基化技术流程,研发建立简化基因组甲基化dRRBS、cfDNA-RBS,单细胞/微量DNA全基因组甲基化及简化高通量甲基化测序技术,RNA甲基化测序等技术和方法,并建立易基因科技全自动化弹性资源生信分析系统。在Nature、Lancet、Science、Nat Commun、 Cell Res、Genome Biol、Blood、PloS Genet、Epigenetics、Epigenomics 、Clin Epigenetic等期刊发表论文100余篇,申请发明12项、软件著作权27项。



T:0755 - 28317900 

V:181 2416 7839

详细信息

大家好,这里是专注表观组学十余年的易基因。今天跟大家介绍一下易基因的技术:微量cfDNA简化基因组甲基化测序(cfDNA-RBS)




cfDNA片段化严重,片段大小常在150bp左右,现有甲基化检测技术包括cfMeDIP和微量WGBS等。无法做到碱基分辨、具有抗体特异性和非特异性捕获、覆盖深度低、检测成本高等特点。常规RRBS富集约70-350bp范围酶切片段,如对于CG含量高的片段将被切割的更碎而无法检测,保留下来的片段反而是CG含量低,无甲基化信息的基因片段。

 

易基因研发cfDNA-RBS技术,特异性捕获CCGG位点两端的DNA,通过亚硫酸盐测序,实现高深度,单碱基分辨检测CG位点甲基化信息。DNA起始量仅需5ng,是目前肿瘤甲基化标志物检测研究的优选技术,应用场景包括肿瘤早筛、肿瘤诊断、个性化用药、实时监控、预后监测等。




应用场景:

  • 癌前病变的癌变预警标志物检测

  • 肿瘤早期筛查标志物检测

  • 肿瘤预后标志物检测

  • 药物疗效预测标志物检测




技术优势:

  • 超低起始量:100-500ul血浆或5ng cfDNA;

  • 测序覆盖度高:20G测序数据,可达10M的CG位点覆盖,涵盖CpG岛、启动子、增强子、CTCF结合位点等多种核心调控区域

  • 单碱基分辨率:在其覆盖范围内可精确分析每一个C碱基的甲基化状态;

  • 性价比高:成本相对于现有技术大幅降低。




技术路线:

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实验策略:

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分析内容:

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送样要求:

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技术指标:

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经典案例:

全基因组cfDNA甲基化分析提高了早期乳腺癌诊断成像的准确性

Liu J,et al.Genome-wide cell-free DNA methylation analyses improve accuracy of non-invasive diagnostic imaging for early-stage breast cancer. Mol Cancer. 2021 Feb 19;20(1):36.


背 景:

基于乳房X线片和超声技术的乳腺影像报告和数据系统(BI-RADS)被广泛用于乳腺癌的早期诊断,但这种方法的假阳性率较高,会导致不必要的活检,尤其是对于BI-RADS-4类的患者来说。而携带DNA甲基化信息的游离DNA(cfDNA)已经成为一种非侵入性的癌症检测方法。


方 法:

本研究收集了接受乳腺X线片和超声检查后活检的210例BI-RADS 4类乳腺病变女性患者。从CHCAMS的活检患者中收集了20个肿瘤样本(10个恶性和10个良性),用于全基因组重亚硫酸盐测序(WGBS)。

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结论:

基于血液的全基因组DNA甲基化研究,以单碱基分辨率从良性肿瘤中检测早期乳腺癌,结果表明结合液体活检和传统的成像诊断可以通过降低假阳性率和避免不必要的损害来改进当前乳腺癌早期诊断的临床实践。

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图:液体活检与传统的诊断显像相结合可以提高早期乳腺癌诊断的准确性。




参考文献:

Liu J,et al.Genome-wide cell-free DNA methylation analyses improve accuracy of non-invasive diagnostic imaging for early-stage breast cancer. Mol Cancer. 2021 Feb 19;20(1):36.

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