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过表达慢病毒构建及包装实验服务
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代理商伊莱博生物科技(上海)有限公司,公司总部位于上海长江软件园。2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,主要以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务创新,建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系,为医学领域的发展做出了重要贡献。
目前已建成并投入使用的实验室面积近2800平方米,包含基础实验平台、组学实验平台以及动物实验平台,基本能够满足科研课题研究的全流程。
伊莱博生物拥有专业的技术支持和实验操作人员团队,核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构,能够提供前沿的、完善的实验技术咨询与服务。
为了响应国家大力发展基础研究的号召,推动实验科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,为广大科研工作者提供实验技术培训服务,从理论和实操两个部分,培养其科研思维以及解决问题的能力,为今后的科研工作奠定坚实的基础。
1 、过表达慢病毒构建及包装实验特点:
1.1 直接包装成为假病毒颗粒,对分裂和非分裂细胞均有感染作用,适合RNAi研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。
1.2 可以通过简单方式,在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。
1.3 可用于基因敲除、基因**和转基因动物研究。
1.4 无需转染试剂,操作简便。
1.5 可以根据客户需要制备多种标记。
2、过表达慢病毒构建及包装实验原理:
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
3 、过表达慢病毒构建及包装流程:
3.1 含有目的基因的慢病毒表达载体的构建和质粒纯化提取。
注:客户也可以提供构建好的重组慢病毒表达载体。
3.2 慢病毒表达载体与包装系统共转染病毒包装细胞。
3.3 收集病毒液。
3.4 纯化和浓缩病毒。
3.5 分装、- 80 oC保存。
3.6 滴度测定及无菌检测。