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稳转株筛选实验
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代理商伊莱博生物科技(上海)有限公司,公司总部位于上海长江软件园。2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,主要以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务创新,建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系,为医学领域的发展做出了重要贡献。
目前已建成并投入使用的实验室面积近2800平方米,包含基础实验平台、组学实验平台以及动物实验平台,基本能够满足科研课题研究的全流程。
伊莱博生物拥有专业的技术支持和实验操作人员团队,核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构,能够提供前沿的、完善的实验技术咨询与服务。
为了响应国家大力发展基础研究的号召,推动实验科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,为广大科研工作者提供实验技术培训服务,从理论和实操两个部分,培养其科研思维以及解决问题的能力,为今后的科研工作奠定坚实的基础。
稳转株长用于基因研究方向,便于长期观察和检验基因对于细胞功能以及蛋白的相互作用。
一般转染实验方法:
用转染质粒或病毒侵染的方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞,根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的试剂进行筛选混合阳性克隆。在阳性混合克隆的基础上,得到单细胞长出的阳性单克隆,继而得到稳定转染细胞株。
一般筛选方法:
1、转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系
对大多数细胞转染效率较低。对于基因过表达,如果转染效率达到40%,基因过表达尚可。但是对于基因干扰实验,对转染效率要求远远高于基因过表达,通常质粒转染无法满足。
另外,质粒游离于细胞质中,很快降解,无法满足较长时间的检测项目;质粒转染整合几率极低,稳定细胞株构建耗时耗力,且得率很低,往往需要挑取单克隆株。
2、病毒感染筛选稳定细胞株
病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效,是目前主流的稳定细胞系筛选方法。用慢病毒制备稳转细胞株,由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主范围广,感染效率高,且与细胞染色体整合而不发生基因重排,是制备稳定细胞株的理想载体。
服务内容:1、稳定:15代以内细胞稳定表达。
2、迅速:一般控制在1个月以内完成构建。
3、经济:价格实惠。
4、质量:对外源基因进行严格鉴定。