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YXB2834 免疫沉淀凝胶IP 蛋白AG融合蛋白琼脂糖凝胶 ProteinAG
- 型号
- YXB2834
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试剂
南京亿迅生物科技有限公司是一家集生物技术咨询、实验室耗材、科研试剂的销售、推广和售后服务为一体的高科技生物企业，为各大科研机构、高校、生物企业提供相关产品。公司凭借良好的产品质量和营销团队的奋力开拓，市场空间逐步扩大，营销网络覆盖全国，为客户供应服务，优质、用心的服务赢得了众多企业的信赖和好评，在生物设备领域迅速崛起。
公司主营生物试剂，化学试剂，人工配置的各类溶液，包括人工血清，人工胃液，人工尿液等等。动物血清，动物红细胞，抗体，质控样品，干扰物质，抗原，生化试剂，实验耗材等10万余种。
亿迅生物总部位于南京，在其他城市也设有办事处，具有一支专业的营销团队，均为本科、硕士、博士学历或相关专业从业多年的人才，有很强的凝聚力和创造力，在产品的营销方面有着丰富的经验，且对生物设备有着深刻的认识和见解。公司坚持以技术为基础，以品质求发展，着力打造生物试剂，并与国内很多科研院所、学校、检测机构等制定销售计划，售后服务网络也日益健全。
公司以“用户为中心，用心服务”为核心价值，始终把满足客户需求、提供全面服务作为服务宗旨，在不断的发展和完善过程中提升技术服务水平。我们相信，通过我们的不断努力和追求，一定能够实现与客户的互利共赢！
详细信息
免疫沉淀凝胶IP 蛋白AG融合蛋白琼脂糖凝胶 ProteinAG
蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF
（Protein AG-Berpharose FF）
产品介绍
蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF是将重组蛋白A蛋白G融合蛋白键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和分离介质。同单独的蛋白A或蛋白G分离介质相比，具有更宽广的结合范围，同时融合后的r-PAG降低了对pH值的依赖，允许在pH5-8进行结合。本产品多用于免疫沉淀（IP）以及免疫共沉淀（Co-IP）研究，及抗体固定及其它相关研究。
规格
1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、25ml、100ml、500ml 纯化流程
以免疫共沉淀（Co-IP）举例：
结合缓冲液：20mM磷酸缓冲液、150mMNaCl、pH7.0
洗脱缓冲液：0.1M甘氨酸，PH3.0
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
（注：所用过柱液体在使用之前建议用至少小于等于0.45μm滤膜过滤）
（1）样品预处理：细胞、植物、动物组织裂解液样品，最终总蛋白浓度选择在0.5-1.0ug/ul范围内为宜，上样前要确保样品溶液拥有合适的离子强度和pH值（如：可以用结合缓冲液对样品液进行稀释或透析）；哺乳动物细胞内有多种成分可以和IgG发生结合，可能会在后续免疫印迹中出现非特异性条带，可通过加入Normal IgG和Protein AG-Berpharose FF的方式预处理裂解液样品，以降低非特异性结合。
（2）抗原-抗体复合物制备：将抗体与含有目的蛋白的裂解液混合，室温震荡孵育30-60min（或4-8度孵育过夜），形成抗原-抗体复合物（可根据已优化好的抗原抗体结合条件处理）。
（注意：抗体的加入量要依据填料量，抗体的加入量过多会影响到抗原-抗体混合物与填料的结合，故建议抗体加入量为填料载量的80%）
（3）填料平衡：取适量的Protein AG Berpharose FF加入到2ml离心管中，500 r离心1min，弃上清，加入0.5ml结合缓冲液，悬浮填料，500 r离心1min，弃上清，重复两次。
（4）抗原-抗体复合物的吸附：将抗原-抗体复合物加入到平衡好的填料中，均匀，在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，促使样品和填料充分接触并吸附，约30min后，500 r离心1min，取上清液，留样检测。
（5）除杂清洗：向上述离心管中加入0.5ml的结合缓冲液，悬浮填料，进行清洗，500 r离心1min，吸弃上清，重复两次。
（6）抗原洗脱：
①非变性洗脱法（洗脱的样品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析）：向离心管中加入5倍柱体积的洗脱缓冲液，用移液器吹打5次，混匀，然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管10min后，500 r离心1min，吸取上清液，收集洗脱组分，即为目标抗原，收集上清液至新的离心管中，并立即加入十分之一体积的中和缓冲液中和缓冲液调节其pH至中性，用于后期功能分析。
②变性洗脱法（洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测）：向离心管中加入25ul 1×SDS-PAGE Loading Buffer混合均 匀，95℃加热5min。然后进行离心，200 r离心1min，收集上清液，进行SDS-PAGE电泳，转膜后进行
Western分析。
免疫沉淀凝胶IP 蛋白AG融合蛋白琼脂糖凝胶 ProteinAG
蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF
（Protein AG-Berpharose FF）
产品介绍
蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF是将重组蛋白A蛋白G融合蛋白键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和分离介质。同单独的蛋白A或蛋白G分离介质相比，具有更宽广的结合范围，同时融合后的r-PAG降低了对pH值的依赖，允许在pH5-8进行结合。本产品多用于免疫沉淀（IP）以及免疫共沉淀（Co-IP）研究，及抗体固定及其它相关研究。
规格
1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、25ml、100ml、500ml 纯化流程
以免疫共沉淀（Co-IP）举例：
结合缓冲液：20mM磷酸缓冲液、150mMNaCl、pH7.0
洗脱缓冲液：0.1M甘氨酸，PH3.0
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
（注：所用过柱液体在使用之前建议用至少小于等于0.45μm滤膜过滤）
（1）样品预处理：细胞、植物、动物组织裂解液样品，最终总蛋白浓度选择在0.5-1.0ug/ul范围内为宜，上样前要确保样品溶液拥有合适的离子强度和pH值（如：可以用结合缓冲液对样品液进行稀释或透析）；哺乳动物细胞内有多种成分可以和IgG发生结合，可能会在后续免疫印迹中出现非特异性条带，可通过加入Normal IgG和Protein AG-Berpharose FF的方式预处理裂解液样品，以降低非特异性结合。
（2）抗原-抗体复合物制备：将抗体与含有目的蛋白的裂解液混合，室温震荡孵育30-60min（或4-8度孵育过夜），形成抗原-抗体复合物（可根据已优化好的抗原抗体结合条件处理）。
（注意：抗体的加入量要依据填料量，抗体的加入量过多会影响到抗原-抗体混合物与填料的结合，故建议抗体加入量为填料载量的80%）
（3）填料平衡：取适量的Protein AG Berpharose FF加入到2ml离心管中，500 r离心1min，弃上清，加入0.5ml结合缓冲液，悬浮填料，500 r离心1min，弃上清，重复两次。
（4）抗原-抗体复合物的吸附：将抗原-抗体复合物加入到平衡好的填料中，均匀，在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，促使样品和填料充分接触并吸附，约30min后，500 r离心1min，取上清液，留样检测。
（5）除杂清洗：向上述离心管中加入0.5ml的结合缓冲液，悬浮填料，进行清洗，500 r离心1min，吸弃上清，重复两次。
（6）抗原洗脱：
①非变性洗脱法（洗脱的样品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析）：向离心管中加入5倍柱体积的洗脱缓冲液，用移液器吹打5次，混匀，然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管10min后，500 r离心1min，吸取上清液，收集洗脱组分，即为目标抗原，收集上清液至新的离心管中，并立即加入十分之一体积的中和缓冲液中和缓冲液调节其pH至中性，用于后期功能分析。
②变性洗脱法（洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测）：向离心管中加入25ul 1×SDS-PAGE Loading Buffer混合均 匀，95℃加热5min。然后进行离心，200 r离心1min，收集上清液，进行SDS-PAGE电泳，转膜后进行
Western分析。
免疫沉淀凝胶IP 蛋白AG融合蛋白琼脂糖凝胶 ProteinAG
