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GPRC5D HEK293 细胞系
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代理商武汉艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc),简称艾美捷科技(AmyJet Scientific)。2010年底成立于九省通衢的湖北省武汉市,历经五年多的发展,已成为国内的集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技生物企业。艾美捷科技总部设在武汉市洪山区光谷大道35号光谷总部二期时代1号楼13层,业务覆盖全国。
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重组HEK293细胞系稳定表达人类GPRC5D(孤儿G蛋白偶联受体,C类群5成员D,NM_018654.1),受CMV启动子控制。
背景
孤儿G蛋白偶联受体,C类群5成员D(GPRC5D)是一种具有七个跨膜片段和短N末端细胞外区域的s黄酸诱导蛋白。GPRC5D在多发性骨髓瘤细胞中的强烈和选择性表达,与B细胞成熟抗原(BCMA)的表达模式相似,使其成为治疗多发性骨髓瘤的有希望的靶点。预计GPRC5D将成为多发性骨髓瘤免疫疗法中CAR T细胞的替代靶点。
作为BPS Bioscience在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品GPRC5D HEK293 细胞系。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
GPRC5D HEK293 细胞系 | BPS-78345 | 查看 |
应用
1. 人类GPRC5D结合实验;筛选GPRC5D配体或抗体。
2. 作为抗GPRC5D CAR-T开发的靶细胞。
细胞培养协议
细胞解冻
1. 在37°C水浴中摇晃装有冷冻细胞的小瓶大约60秒。细胞解冻后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速将小瓶的全部内容转移到含有10 ml预热的解冻培养基1(不含潮霉素B)的试管中。在37°C水浴中放置细胞过久将导致活性迅速丧失。
2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并将细胞在5 ml预热的解冻培养基1(不含潮霉素B)中重悬。
3. 将重悬的细胞转移到T25或T75培养瓶中,并在37°C、5% CO2培养箱中培养。
4. 培养24小时后,检查细胞附着和活性。更换培养基为新鲜的解冻培养基1(不含潮霉素B),并继续在37°C、5% CO2培养箱中培养,直到细胞准备好传代。
5. 细胞应在w全融合前传代。在s次传代及后续传代中,使用生长培养基1C(含潮霉素B)。
细胞传代
1. 抽去培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05% y酶/EDTA从培养容器中分离细胞。
2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1C并转移到试管中。以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并将细胞在含潮霉素B的生长培养基1C中重悬。按照每周1:5的期望亚培养比例将细胞种入新的培养容器中。
细胞冷冻
1. 抽去培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05% y酶/EDTA从培养容器中分离细胞。
2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1C并计数细胞。
3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并将细胞在4°C冷冻培养基(BPS Bioscience #79796,或10% DMSO + 90% FBS)中重悬,细胞浓度约为2 x 10^6个细胞/ml。
4. 将1 ml的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放入保温容器中缓慢冷却,并在-80°C下保存过夜。
5. 次日将小瓶转移到液氮中保存。
图1. 利用流式细胞仪分析人类GPRC5D HEK293细胞系表面人类GPRC5D的表达。
人类GPRC5D HEK293细胞(蓝色)或对照HEK293细胞(绿色)使用GPRC5D APC偶联抗体(R&D Systems, #FAB6300A)染色,并通过流式细胞仪分析GPRC5D的表达。
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Products Catalog # Size
GPRC5D (Cynomolgus) CHO Cell Line 78338 2 vials
GPRC5D CHO Cell Line 78337 2 vials
GPRC5D (Cynomolgus) HEK293 Cell Line 78346 2 vials
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