叶绿体 蛋白提取试剂盒 说明书
货号 ：R0060
规格 ：50T/100T
产品内容 ：
注：蛋白提取液：含多种有效成分，可以充分释放蛋白，又可结合释放出的蛋白防止沉淀。提取液中已
含有磷酸酶抑制剂混合物。
蛋白酶抑制剂混合物：包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、
Bestatin、E-64。避免反复冻融，试剂盒不能短时间内用完，抑制剂混合物不可一次全部加入提取液。
保存 ：蛋白提取液 2-8℃保存，蛋白酶抑制剂混合物于-20 ℃保存。有效期 1 年。
产品简介：
叶绿体是植物细胞所*的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能，
所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。
索莱宝叶绿体蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取叶绿体蛋白，提取过程简单
方便，可在 1 小时内提取得到高质量的叶绿体蛋白。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合
物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，提
取的蛋白可用于 Western Blotting、免疫共沉淀、酶活测定等各种下游蛋白研究实验。
1．使用方便
2．将蛋白提取的时间缩短 1 小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白
酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所
有重要的蛋白酶活性。
操洽⽅法 ：
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样本处于低温。
1．取新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。
2．每 2g 样本加入 4ml 提取液 A。
3．用研钵快速研磨 30-60 秒，或者用组织搅碎机高速匀浆 1 分钟。
4．将匀浆用 3 层纱布或者 400 目滤网过滤。
5．将滤液 200×g 离心力(约 1000rpm，不同离心机不一样，以实际为准)离心 1 分钟。将上清移入另一干净
离心管。
试剂盒组成  50T  100T
提取液A  200ml  400ml
提取液B  25ml  50ml
蛋白酶抑制剂混合物  100ul  200ul
Solarbio
Beijing Solarb io Science & Technology Co., Ltd
Tel: 010- - 56371207
Fax: 010- - 56371281/82
Http://www.solarbio.cn
6．将上清 1000×g（约 3000rpm）离心 5 分钟。
7．弃上清，收集沉淀。
8．在沉淀中加入 200ul 抽提液 B 和 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后在冰上静置 15 分钟，中间每隔 5
分钟高速涡旋振荡 10 秒。
9．将提取液在 4℃，12000×g 离心 5 分钟，取上清。
10．即得叶绿体蛋白。
11．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或调整相应的浓度后直接用于下游实验。
注意事项 ：
1. 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心管底，避免开盖时试剂损
失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁
剂。
5. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
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