维生素B1（VB1）含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号: BC4190
规格: 50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
1、提取液：内含不溶物，使用前摇匀；
2、标准品：10mg维生素B1。临用前加入1mL稀释液，配成10mg/mL（即10000µg/mL）的标准液。
产品说明：
维生素B1（Vitamin B1）又称硫胺素，以辅酶形式参与糖的分解代谢，在生物体能量代谢中有重要的作用。VB1在碱性条件下还原铁*生成亚铁*，亚铁*与Fe³⁺在弱酸条件下生成普鲁士蓝，测定布鲁士蓝在704nm下的特征吸收峰，即可反映VB1的含量。

技术指标：
低检出限： 7.366 µg/mL
线性范围： 7.8125-250 µg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。

操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件

实验实例：

1. 称取0.1g肾脏，加入0.6mL提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，13000rpm离心10min，取上清，将上清稀释20倍之后按照测定步骤操作，测得计算ΔA= A测定管-A空白管=0.339-0.265=0.074，带入标准曲线y=0.006x+0.001，计算x=12.17μg/mL，按样本质量计算VB1含量得： VB1（μg/g质量）= x×V样总÷W×20（稀释倍数）=12.17×1÷0.1×20=2434 μg/g 质量。

2. 称取0.1g三叶草，加入0.6mL提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，13000rpm离心10min，取上清，将上清稀释40倍之后按照测定步骤操作，测得计算ΔA= A测定管-A空白管=0.748- 0.265=0.483，带入标准曲线y=0.006x+0.001，计算x =80.33μg/mL，按样本质量计算VB1含量得： VB1（μg/g质量）= x×V样总÷W×40（稀释倍数）=80.33×1÷0.1×40=32132 μg/g 质量。

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