土壤碱性蛋白酶（S-ALPT）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0880
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1瓶加入6 mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用，用不完的试剂可以2-8℃保存4周；

2. 标准品：20μmol/mL 酪*酸溶液。

产品说明：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤碱性蛋白酶在碱性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。碱性条件下，土壤碱性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪*酸；在碱性条件下，*氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水、30-50目筛。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件

注意事项：
当吸光值大于1时，建议将上清液用蒸馏水稀释后进行测定，计算时注意乘以稀释倍数。
实验实例：

1. 分别称取0.1g三叶草土于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测定吸光度，计算ΔA测定=A测定-A对照=0.320-0.232=0.088，ΔA标准=A标准-A空白=0.540-0.028=0.512，按土壤质量计算酶活得：

土壤碱性蛋白酶(U/g 土样)= 0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W= 0.1×0.088÷0.512÷0.1=0.1718 U/g 土样。

1. 分别称取0.1g森林3号土样于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测定吸光度，计算ΔA测定=A测定-A对照=0.553-0.460=0.093，ΔA标准=A标准-A空白=0.540-0.028=0.512，按土壤质量计算酶活得：

土壤碱性蛋白酶(U/g 土样)= 0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W= 0.1×0.093÷0.512÷0.1=0.1816 U/g 土样。
相关发表文献：
[1]Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai,et al. Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi. Environmental Science and Pollution Research. May 2018;(IF2.914)
[2]Zhang M, Wang W, Wang J, et al. Dynamics of biochemical properties associated with soil nitrogen mineralization following nitrification inhibitor and fungicide applications[J]. Environmental Science and Pollution Research, 2017, 24(12): 11340-11348.
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