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T4 DNA 连接酶 T4 DNA Ligase南京赛泓瑞优质试剂之一,*,质量保证 。
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T4 DNA 连接酶产品介绍
是从表达基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5’-磷酸末端和3’羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交中的单链中的单链切口。
T4 DNA 连接酶产品特点
1. 粘性末端或平末羰双链DNA的连接。
2. 双链寡核苷酸接头与双链DNA连接。
3. 双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复。
4. 连接酶介导的RNA检测。
5. 位点特异性突变。
6. 扩增片段长度多态性。
产品储存
-20℃保存
T4 DNA 连接酶活性定义
1个Weiss活性单位是指在ATP-PPi交换反应中,37°C、20分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量。
保存缓冲液
20mM Tris-HCL (PH7.5),1mM DTT,50Mm KCL,0.1mM EDTA,50%甘油 10×Ligation Buffer 400mM Tris-HCL,100mM MgCl2,100mM DTT,5mM ATP(PH7.8,25°C)
NEB 10,000 units M0202V
NEB 100,000 units M0202L
NEB 20,000 units M0202S
, high conc. (2,000,000 units/ml) NEB 100,000 units M0202M
, high conc. (2,000,000 units/ml) NEB 20,000 units M0202T
T4 Gene 32 Protein NEB 500 µg M0300L
T4 Gene 32 Protein NEB 100 µg M0300S
T4 PDG (T4 Endonuclease V) NEB 10,000 units M0308L
T4 PDG (T4 Endonuclease V) NEB 2,000 units M0308S
T4 Polynucleotide Kinase NEB 250 units M0201V
T4 Polynucleotide Kinase NEB 2,500 units M0201L
T4 Polynucleotide Kinase NEB 500 units M0201S
T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) NEB 1,000 units M0236L
T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) NEB 200 units M0236S
T7 Endonuclease I NEB 1,250 units M0302L
T7 Endonuclease I NEB 250 units M0302S
T7 Exonuclease NEB 5,000 units M0263L
T7 Exonuclease NEB 1,000 units M0263S
Taq DNA Ligase NEB 1,000 units M0208V
Taq DNA Ligase NEB 10,000 units M0208L
Taq DNA Ligase NEB 2,000 units M0208S
TaqI Methylase NEB 5,000 units M0219L
TaqI Methylase NEB 1,000 units M0219S
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase NEB 1,250 units M0296L
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase NEB 250 units M0296S
Tma Endonuclease III NEB 2,500 units M0291L
Tma Endonuclease III NEB 500 units M0291S
Topoisomerase I (E. coli) NEB 500 units M0301L
Topoisomerase I (E. coli) NEB 100 units M0301S
Tth Endonuclease IV NEB 2,500 units M0294L
Tth Endonuclease IV NEB 500 units M0294S
Tth RecA NEB 100 µg M2402S
Universal USER Cassette NEB 50 pmol N5504S
Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) NEB 1,000 units M0281L
Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) NEB 200 units M0281S
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) NEB 500 units M0280V
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) NEB 5,000 units M0280L
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) NEB 1,000 units M0280S
USER Enzyme NEB 250 units M5505L
USER Enzyme NEB 50 units M5505S
β-Agarase I NEB 500 units M0392L
β-Agarase I NEB 100 units M0392S
Promega 100U M1801
Promega 500U M1804
即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
用途:常用于DNA 和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM(300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共1000单位。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50%(v/v)glycerol。
10X Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制。
包装清单:
产品编号
产品名称
包装
D7008-1
(1000U/μl)
200,000U
D7008-2
10X Ligation Buffer
1.5ml
-
说明书
1份
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯仿抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
需进行平端连接或快速连接时,*使用碧云天的快速DNA连接试剂盒(D7002/D7003)。可以进行平端连接,但效率较低。
普通的连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,*先在65℃孵育10分钟使失活,以避免和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
饲料、谷物 |
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