二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶试剂盒是植物光合作用中固定 CO2 的关键酶，同时参与植物 光呼吸代谢途径，制约着碳素向 Calvin 循环和光呼吸循环分流，作为一种能够催化羧化反应和加氢 反应的双功能酶，其活性的大小对光合速率的研究具有重要意义。 Rubisco 可催化核酮糖-1,5-二磷酸（RuBP）和 CO2 结合生成 3-磷酸甘油酸（PGA），3-磷酸甘油 酸可进一步在 3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的催化作用下生成甘油醛-3-磷酸，反应过程 中伴随着 NADH 氧化生成 NAD+，NADH 在 340 nm 处有特征吸收峰，通过测定 340 nm 处吸光度的 下降速率即可表征 Rubisco 活性。

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶试剂盒注意事项为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确 认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取 2-3 个预期差异较大的样本进行预测定， 过程中问题请您及时与工作人员联系。

测定过程中所需要的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、研钵 /匀浆器、台式离心机、可调式移液器、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。

吸光值测定：①充分混匀并立即开始计时，测定 20 s（总时间）时 340 nm 处吸光值，记为 A1 测 定和 A1 空白；②25℃恒温准确反应 300 s，测定 320 s（总时间）时 340 nm 处吸光值，记为 A2 测定 和 A2 空白；③计算 ΔA 测定=A1 测定-A2 测定，ΔA 空白=A1 空白-A2 空白，ΔA=ΔA 测定-ΔA 空白。 注：空白组只需测定 1-2 次。