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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 锚定蛋白B抗体 |
英文名称 | Ankyrin B |
规格 | 0.2ml |
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
无水二钠(分子生物学级) 进口/国产 规格:>98.5%,分子生物学级纯度:>95%
月桂酰基肌氨钠(分子生物学级) 进口/国产 规格:>95%,分子生物学级纯度:>95%
乙铵(分子生物学级) 进口/国产 规格:>98%,分子生物学级纯度:>95%
微晶纤维素(100 um) 进口/国产 规格:BR,100 um纯度:>95%
乳糖;α乳糖,一水 进口/国产 规格:BR纯度:>95%
化钙二水 进口/国产 规格:>99%,BR纯度:>95%
乙二 进口/国产 规格:BR纯度:>95%
镁七水(分子生物学级) 进口/国产 规格:>98%,分子生物纯度:>95%
糖化酶;葡萄糖淀粉酶 进口/国产 规格:BR,10万u/G纯度:>95%
聚乙二4000 进口/国产 规格:>99%,BR纯度:>95%
无水二钾 进口/国产 规格:>98%,BR纯度:>95%
酰 进口/国产 规格:>99%,BR纯度:>95%
聚乙二8000 进口/国产 规格:>99%,分子生物学级纯度:>95%
化锂(分子生物学级) 进口/国产 规格:>98%纯度:>95%
亚铁铵六水 进口/国产 规格:>99%,BR纯度:>95%
红四唑 进口/国产 规格:>98%,BR纯度:>95%
ZNF288/ZBTB20 指蛋白288一抗 * 0.2ml Formestane
ALOX15/15 Lipoxygenase 1 花生四15脂氧合酶1一抗 * 0.2ml Fosipril sodium
ABI3BP ABI基因家族成员3结合蛋白一抗 * 0.2ml Furosemide
MTCBP1/ADI1 膜型基质金属蛋白酶胞质尾结合蛋白1一抗 * 0.2ml Furosemide
BCMP11/AGR3 癌膜蛋白11一抗(前梯度同源蛋白2) * 0.2ml Gemfibrozil
ALDH1A1 胞质脱酶1一抗 * 0.2ml Gemfibrozil
ABH8/ALKBH8 AlkB同源蛋白8一抗 * 0.2ml Gliclazide
AMFR/Gp78/RNF45 环指蛋白45/自分泌运动因子受体一抗 * 0.2ml Gliclazide
锚定蛋白B抗体Lactobacillus agilis分离基物: 淡水鱼虾提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0006生长条件: 37℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Micromonospora sp.分离基物: 土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 代谢产物具有抗菌活性。培养基: 0012生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法
Penicillium oxalicum提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产生纤维素酶培养基: 0014生长条件: 25-28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Eutypla sp.分离基物: 沉积物/TVG沉积物提供形式: 斜面培养物模式菌株: no应用领域: 潜在的生物活性微生物/可能具有抗菌、抗肿瘤活性培养基: 745生长条件: 25℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法
Escherichia coli提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no培养基: CM0051生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Psychrobacter sp.分离基物: 水样/表层海水提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 深海细菌培养基: 471生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
Enterococcus faecalis分离基物: 弱雏肝脏提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 耐药性研究培养基: 396生长条件: 37存储条件: 真空冷冻干燥法;
Psathyrla hydrophila (Bull.) Maire分离基物: 子实体提供形式: 斜面培养物模式菌株: no培养基: 14生长条件: 25存储条件: 定期移植法
Bacillus subtilis分离基物: 土壤提供形式: 斜面培养物;冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 淀粉酶培养基: 2生长条件: 37℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法