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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 碱性亮氨酸拉链蛋白BZW1抗体 |
英文名称 | BZW1 |
规格 | 0.2ml |
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
雪腐镰刀菌 Fusariumnivale
黑色葡萄穗霉 StachybotrysatraCorda
禾谷镰孢菌 Fusariumgraminearum
米根霉 Rhizopusoryzae
米黑根毛霉 Rhizomucormiehei
林肯链霉菌 Streptomyceslincolnensis
热黄拟无枝酸菌 Amycolatopsisthermoflav
棘孢小单胞菌 Micromosporaechispora
巨孢链霉菌 Streptomycesmegasporus
大孢链霉菌 Streptomycesmacrosporus
七叶苷发酵管20支七叶苷发酵管BR
水杨苷发酵管20支水杨苷发酵管BR
肝素抗凝管5毫升肝素抗凝管
10毫升
乳菌检测计数显色培养基250克乳菌检测计数显色培养基乳菌快速显色分离培养
蜡样芽孢杆菌计数显色培养基250克蜡样芽孢杆菌计数显色培养基蜡样芽孢杆菌快速显色分离培养
OF发酵管20支OF发酵管BR
ONPG发酵管20支ONPG发酵管BR
Rambach琼250克Rambach琼金黄色葡萄球菌快速显色分离培养
耶尔森氏菌显色培养基250克耶尔森氏菌显色培养基耶尔森氏菌快速显色分离培养
克雷伯氏显色培养基250克克雷伯氏显色培养基克雷伯氏菌快速显色分离培养
马肉汤1万毫升/袋马肉汤猪肺疫、牛肺疫、兔出败等疫苗及检验用
碱性亮氨酸拉链蛋白BZW1抗体Halomonas ventosae分离基物: 土壤/盐渍土提供形式: 斜面培养物模式菌株: no应用领域: 微生物/高盐菌(盐度20%-26%)培养基: 471生长条件: 20-25℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
Escherichia coli分离基物: LB培养基提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 质粒保藏菌用于基因测序和进一步构建基因敲除质粒培养基: 33生长条件: 37℃存储条件: -80℃冰箱冻结法
Bacillus licheniformis提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 用于微生物采油培养基: 33生长条件: 30-50℃存储条件: -80℃冰箱冻结法
Mycobacterium tuberculosis提供形式: 冻干物安全等级: 3模式菌株: no应用领域: 研究生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Escherichia coli提供形式: 冻结物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 来源于Aspergillus ficuum的gla-G2基因的编码产物是糖化酶,即葡萄糖淀粉酶(glucoamylase,EC. 3.2.1.3),是一种酸性糖苷水解酶,从淀粉或淀粉类似物分子的非还原端顺序切开α-1, 4-糖苷键,生成β-葡萄糖。培养基: 33生长条件: 37℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;定期移植法
伤寒沙门氏菌种属: Salmonla typhi提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 噬菌体分型用 Vi B2 9,12,Vi d -培养基: CM0051生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Saccharomyces cerevisiae提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 酒精酵母培养基: 0013生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
棉阿舒囊霉种属: Ashbya gossypii提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产核黄素培养基: 0013生长条件: 25-28℃存储条件: 真空冷冻干燥法;矿物油法
Erythrobacter vulgaris分离基物: 沉积物/TVG沉积物提供形式: 冻干物模式菌株: no应用领域: 大洋细菌培养基: 471生长条件: 25℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法